氯沙坦對殘腎大鼠腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞保護作用的研究.pdf

1、[目的] 本課題旨在探討血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)對殘腎大鼠腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞的保護作用及對相關促進/抑制血管生成因子表達的影響，為ARB類藥物臨床治療慢性腎臟病(CKD)提供新的實驗和理論依據(jù)。 [方法] 通過結(jié)扎左腎腎動脈上支、中支和切除右腎建立殘腎大鼠模型。32只8周齡雄性SD大鼠(體重為200-250g)隨機分成三組：(1)氯沙坦組(n=12)，給予氯沙坦25mg/kg/day灌胃；(2)殘腎模

2、型組(n=12)，給予等量溶媒灌胃；(3)假手術組(n=8)，給予等量溶媒灌胃。于實驗15周末，收集尿量檢測24h尿蛋白，取血檢測白蛋白、尿素氮、肌酐和膽固醇、甘油三酯。取腎組織，用于組織病理(PASM染色)和免疫組化(CD31和大鼠內(nèi)皮細胞抗原-1即RECA-1染色代表腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞密度)，比較三組大鼠腎小球纖維化程度和毛細血管內(nèi)皮細胞密度；另取腎組織，用于檢測促進/抑制血管生成因子(VEGF/TSP-1)基因和蛋白表達水平。

3、 [結(jié)果] 1.與假手術組比較，殘腎模型組血尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯水平和24小時尿蛋白定量明顯升高(P<0.05)；與殘腎模型組相比，氯沙坦組血尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯水平和24小時尿蛋白定量明顯下降(P<0.05)，上述三組血白蛋白水平無明顯差異(P>0.05)。 2.腎組織病理顯示，殘腎模型組腎小球硬化指數(shù)(GSI)明顯高于假手術組(0.89±0.12 vs0.29±0.05)(P<0.05)，

4、氯沙坦顯著降低了殘腎大鼠腎小球硬化指數(shù)(0.34±0.02 vs0.89±0.12)(P<0.05)。 3.腎組織免疫組化顯示，CD31標示的殘腎模型組腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞密度明顯低于假手術組(1.99±0.31 vs7.21±0.57)(P<0.05)，氯沙坦顯著增加了殘腎大鼠腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞密度(5.93±0.70 vs1.99±0.31)(P<0.05)。 4.RT-PCR法、Western blot法檢測

5、腎組織中VEGF，TSP-1基因和蛋白表達水平。氯沙坦顯著增加了殘腎大鼠VEGF(P＜0.01)的表達水平，同時降低了殘腎大鼠TSP-1(P＜0.01)表達水平。 [結(jié)論] 1.氯沙坦降低了殘腎大鼠血膽固醇、甘油三酯和24小時尿蛋白水平，改善了腎功能。 2.氯沙坦增加了殘腎大鼠腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞密度，減輕了腎小球纖維化。 3.氯沙坦促進了殘腎大鼠血管生成促進因子VEGF的表達，抑制了血管生成抑制因子T