肺癌酪氨酸激酶ALK、ROS1、RET融合基因的檢測(cè)及臨床意義探討.pdf

1、目的:
　　檢測(cè)ALK、ROS1、RET融合基因在肺癌患者中的發(fā)生率，分析其與臨床特征之間的關(guān)系，為臨床上肺癌的分子靶向治療提供參考依據(jù)。
　　方法:
　　1.在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院纖維支氣管鏡室收集205例自2012年10月至2013年4月期間經(jīng)纖維支氣管鏡下活檢取得的新鮮肺癌或胸膜組織標(biāo)本。
　　2.用蛋白免疫印跡（Western blotting，WB）技術(shù)檢測(cè)ALK、ROS1、RET基因蛋白在腫瘤組織中的表

2、達(dá)情況。
　　3.在病理科收集WB中檢測(cè)基因融合陽性病例的福爾馬林固定石蠟包埋(Formalin Fixed Paraffin Embedded，F(xiàn)FPE)組織標(biāo)本，切片后進(jìn)行免疫組化技術(shù)(Immunohistochemistry, IHC)驗(yàn)證。
　　4.分別從年齡、性別、吸煙史、病理類型、病理分化程度這五個(gè)臨床特征上分別對(duì)ALK、ROS1、RET基因突變陽性和陰性的肺癌患者進(jìn)行對(duì)比。
　　5.數(shù)據(jù)資料采用用連續(xù)校正

3、x2檢驗(yàn)(Continuity Correction x2 Test)和Fisher精切概率法(Fisher's exact test)分別比較ALK、ROS1、RET基因突變陽性和陰性病人的臨床特征之間的關(guān)系。p＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果:
　　1.205例肺癌患者的總體年齡均數(shù)為58.72±9.31歲(32-80歲)。其中男性169例。從吸煙史來分析，非吸煙48例;吸煙157例。在病理類型上，NSCLC163例，

4、SCLC42例。在103例可評(píng)估病例中，高分化肺癌19例，中分化40例，低分化44例。
　　2.205例肺癌患者中，6例為ALK基因突變陽性，發(fā)生率為2.9％，在NSCLC中為1.8％(3/163);其中5例為ALK融合，1例為ALK突變野生型。5例存在ROS1基因突變，發(fā)生率為2.4％，均為NSCLC，其中1例為ROS1突變野生型。2例存在RET融合陽性者均為SCLC。
　　3.ALK融合陽性及陰性患者在年齡(p=0.48

5、)、性別(p=0.95)、吸煙史(p=0.57)、病理類型(p=0.95)之間的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;ROS1基因突變陽性及陰性患者在年齡(p=0.21)、性別(p=0.89)、吸煙史(p=0.39)、病理類型(p=0.68)之間的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;RET融合基因陽性及陰性患者在年齡(p=0.95)、吸煙史(p=0.35)、病理類型(p=0.06)方面的差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與性別(p=0.03)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.ALK融

6、合多見于吸煙(60％，3/5)、男性(80％，4/5)，也可在小細(xì)胞肺癌中發(fā)生;ROS1融合陽性多見于男性(75％，3/4)、鱗癌(75％，3/4)患者;RET融合陽性多見于女性/不吸煙，也可在小細(xì)胞肺癌中發(fā)生。
　　5.沒有發(fā)現(xiàn)同時(shí)存在ALK、ROS1、RET基因變異中兩種或兩種以上變異的病例。
　　結(jié)論:
　　1.ALK、ROS1、RET融合代表了肺癌的一種新的分子亞型，也可發(fā)生在小細(xì)胞肺癌中。
　　2.經(jīng)纖