EML4-ALK融合基因、ALK蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　應(yīng)用擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)法(ARMS法)和免疫組化（IHC）法，分別從基因水平和蛋白質(zhì)水平觀察EML4-ALK融合基因和ALK蛋白在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）標(biāo)本中的表達(dá)，分析EML4-ALK基因融合非小細(xì)胞肺癌的臨床病理特征，并比較ARMS法和IHC法檢測(cè)EML4-ALK融合基因的一致性。
　　方法:
　　1.第一部分：采用EliVisionTM plus IHC染色方法檢測(cè)280例NSCLC標(biāo)本ALK蛋白表

2、達(dá)情況，分析其與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性。
　　2.第二部分：采用ARMS法檢測(cè)第一部分標(biāo)本中ALK蛋白陽(yáng)性病例及隨機(jī)選取的部分陰性病例的EML4-ALK融合基因表達(dá)情況，分析其與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性，以及與ALK蛋白表達(dá)的一致性。
　　結(jié)果:
　　1.280例非小細(xì)胞肺癌中44例（15.7％）ALK蛋白陽(yáng)性，ALK蛋白表達(dá)與年齡、性別、吸煙史、臨床分期和腫瘤組織學(xué)類(lèi)型具有相關(guān)性（P＜0.05），而與腫瘤大小無(wú)相關(guān)性（P＞

3、0.05）。
　　2.90例進(jìn)行ALK融合基因檢測(cè)的NSCLC中29例（32.2%）存在EML4-ALK基因融合，其中25例（86.2%）為E6;A20、E13;A20、E20;A20位點(diǎn)融合，1例（3.4%）為E2;A20、E3;A20、E17;A20、E18;A20位點(diǎn)融合，3例（10.4%）為E6;A20、E13;A20、E20;A20和E2;A20、E3;A20、E17;A20、E18;A20雙位點(diǎn)融合。EML4-ALK融

4、合非小細(xì)胞肺癌與年齡、吸煙史、腫瘤組織學(xué)類(lèi)型和亞型以及EGFR突變狀態(tài)具有相關(guān)性（P＜0.05），而與性別、腫瘤大小、臨床分期無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。
　　3.ALK蛋白陽(yáng)性標(biāo)本中，65.9%（29/44）出現(xiàn)EML4-ALK融合基因表達(dá)，其中IHC3+（21/90）病例，EML4-ALK融合基因陽(yáng)性率100%，IHC檢測(cè)EML4-ALK融合基因的敏感性和特異性分別為100%和78.9%；90例進(jìn)行EML4-ALK融合基因檢測(cè)標(biāo)

5、本中，44例（48.9%）為手術(shù)標(biāo)本，46例（51.1%）為穿刺活檢標(biāo)本，手術(shù)標(biāo)本中，IHC3+、2+、1+與PCR的符合率分別為100%、57.1%和0%，穿刺標(biāo)本中，IHC3+、2+、1+與PCR的符合率分別為100%、100%和20%，IHC在手術(shù)標(biāo)本和穿刺活檢標(biāo)本中檢測(cè)EML4-ALK融合基因的敏感性和特異性分別為100%、72.2%和100%、80%。
　　結(jié)論:
　　EML4-ALK基因融合NSCLC作為一種獨(dú)特

6、的肺癌亞型，具有一定的臨床病理特征，如常見(jiàn)于年輕、無(wú)/少吸煙腺癌患者。EML4-ALK融合方式具有多樣性和復(fù)雜性,因此在臨床分子檢測(cè)中應(yīng)全面關(guān)注EM L4-ALK的融合變異體，以提高檢出率。ALK D5F3單抗用于ALK融合基因的IHC檢測(cè)敏感性高，特異性稍低。EML4-ALK融合基因和ALK蛋白表達(dá)具有較高一致性。在穿刺活檢標(biāo)本和手術(shù)標(biāo)本中采用I HC檢測(cè)ALK蛋白水平反映ALK融合基因情況均具有高準(zhǔn)確性。I HC檢測(cè)ALK蛋白可以作