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1、目的:臨床觀察發(fā)現(xiàn)吸煙和焦慮性疾病之間有較高的并發(fā)率,但兩者相互影響的神經(jīng)機(jī)制仍不清楚;另一方面,恐懼消退缺陷常導(dǎo)致焦慮性疾病產(chǎn)生。本研究擬通過檢測(cè)慢性尼古丁處理對(duì)大鼠恐懼消退的影響,以期探討尼古丁依賴伴焦慮性疾病的可能機(jī)制。
方法:1、慢性尼古丁處理:連續(xù)14天大鼠背部皮下注射尼古丁,采用遞增劑量模式,對(duì)照組大鼠注射同體積生理鹽水,建立大鼠尼古丁依賴動(dòng)物模型。
2、恐懼條件化及消退:共分為四個(gè)訓(xùn)練階段(習(xí)慣化、恐懼
2、條件化、消退與消退檢測(cè))。停藥后第13天,進(jìn)行習(xí)慣化訓(xùn)練;停藥后第14天進(jìn)行線索性(PDC和UPDC范式,聲刺激為條件化刺激,足底電擊為非條件化刺激)或場(chǎng)景性(場(chǎng)景作為條件化刺激,足底電擊作為非條件化刺激)恐懼條件化訓(xùn)練;條件化后24小時(shí)和48小時(shí),分別行線索性或場(chǎng)景性恐懼消退訓(xùn)練和消退檢測(cè);條件化恐懼行為檢測(cè)指標(biāo)為聲刺激或場(chǎng)景誘發(fā)的大鼠僵直時(shí)間,同時(shí)分析大鼠對(duì)聲刺激和場(chǎng)景刺激的非特異性僵直反應(yīng)。
3、自發(fā)活動(dòng)檢測(cè):停藥后24
3、小時(shí)與第13天,進(jìn)行自發(fā)活動(dòng)檢測(cè)(10分鐘內(nèi)的水平活動(dòng)距離、直立次數(shù)、理毛時(shí)間、中央?yún)^(qū)和外周區(qū)時(shí)間)。
4、足底電擊敏感性檢測(cè):停藥后第14天進(jìn)行,將大鼠放入檢測(cè)箱,電流從0.05毫安開始以0.05毫安幅度遞增,記錄大鼠出現(xiàn)注意反應(yīng)、退縮反應(yīng)和驚叫反應(yīng)的最小電流強(qiáng)度。
5、戒斷癥狀檢測(cè):分別與停藥后24小時(shí)和14天進(jìn)行,將大鼠放入圓形透明玻璃缸中觀測(cè)30min,指標(biāo)包括:濕狗樣抖動(dòng)、前爪震顫、嗅探行為、搔抓行為的次數(shù)
4、;每5min是否出現(xiàn)上眼瞼下垂、舔陰、身體震顫、齒顫行為,出現(xiàn)記為1,否則為0。
結(jié)果:1、在PDC范式中:尼古丁組與生理鹽水組大鼠僵直時(shí)間在恐懼條件化與消退訓(xùn)練階段均無顯著性組間差異;在消退檢測(cè)階段,尼古丁組大鼠僵直時(shí)間顯著高于生理鹽水組大鼠;兩組大鼠在消退訓(xùn)練與消退檢測(cè)階段的消退比率均無顯著性組間差異。
2、在UPDC范式中:尼古丁組與生理鹽水組大鼠僵直時(shí)間在恐懼條件化、消退訓(xùn)練與消退檢測(cè)階段均無顯著性組間差異;
5、兩組大鼠在消退訓(xùn)練與消退檢測(cè)階段的消退比率也無顯著性組間差異。
3、在場(chǎng)景性任務(wù)中:尼古丁組與生理鹽水組大鼠僵直時(shí)間在恐懼條件化與消退檢測(cè)階段均無顯著性組間差異;在消退訓(xùn)練階段,尼古丁組大鼠僵直時(shí)間顯著高于生理鹽水組大鼠;兩組大鼠在消退訓(xùn)練與消退檢測(cè)階段的消退比率均無顯著性組間差異。
4、自發(fā)活動(dòng):停藥后24小時(shí),尼古丁組大鼠水平活動(dòng)距離和直立次數(shù)顯著下降、理毛行為顯著增加、中央?yún)^(qū)和外周區(qū)的時(shí)間沒有顯著改變,而停藥1
6、3天兩組自發(fā)活動(dòng)水平無顯著性組間差異;
5、足底電擊敏感性:停藥后14天兩組大鼠足底電擊敏感性沒有顯著性組間差異;
6、對(duì)聲音和場(chǎng)景的非特異性僵直反應(yīng):兩組大鼠對(duì)聲音和場(chǎng)景本身誘發(fā)的非特異性僵直無顯著性組間差異;
7、戒斷癥狀:停藥24小時(shí)尼古丁組大鼠表現(xiàn)出明顯的戒斷癥狀,而停藥后第14天,兩組大鼠的戒斷癥狀無顯著性組間差異。
結(jié)論:1、在 PDC范式中,慢性尼古丁處理損傷長(zhǎng)時(shí)程恐懼消退記憶,而對(duì)
7、條件化恐懼反應(yīng)的獲得及短時(shí)程恐懼消退記憶無影響;
2、在UPDC范式中,慢性尼古丁處理對(duì)條件化恐懼反應(yīng)的獲得、長(zhǎng)時(shí)程恐懼消退記憶及短時(shí)程恐懼消退記憶均無影響;
3、在場(chǎng)景性范式中,慢性尼古丁處理增強(qiáng)條件化恐懼記憶的保持,而對(duì)條件化恐懼反應(yīng)的獲得、長(zhǎng)時(shí)程恐懼消退記憶及短時(shí)程恐懼消退記憶均無影響;
4、慢性尼古丁處理對(duì)基于PDC范式的長(zhǎng)時(shí)程恐懼消退記憶損傷效應(yīng)與對(duì)場(chǎng)景性條件化恐懼記憶增強(qiáng)效應(yīng)并非由于慢性尼古丁處
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