TNF-α對聽覺恐懼條件反射功能的影響及相關機制.pdf

1、前言：
　　在炎癥感染過程中，免疫細胞產生大量的促炎因子，作用于大腦引起認知功能障礙。腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor alpha，TNF-α)是重要的促炎因子之一。狼瘡腦?。↙upus Encephalopathy，LE）患者腦脊液中的TNF-α水平顯著增高，TNF-α可能在LE中扮演著重要角色，TNF-α在LE中的作用機制也越來越受到關注。
　　大腦記憶的形成是突觸可塑性的過程，大量文獻報道T

2、NF-α對學習和記憶產生不利影響。在生理條件下，谷氨酸對突觸可塑性、學習和發(fā)育是非常重要的，過多的谷氨酸誘發(fā)神經(jīng)興奮性中毒，并與多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程相關。TNF-α促進星形膠質細胞和小膠質細胞釋放谷氨酸，過量的谷氨酸釋放，通過過度刺激神經(jīng)元上的門冬氨酸受體(NMDAR)發(fā)揮其神經(jīng)毒性作用。因此，過量的谷氨酸引起的神經(jīng)毒性可能就是TNF-α引起學習和記憶能力障礙的機制。應用MK-801阻斷NMDAR，進而控制谷氨酸轉運可能是一個

3、潛在的治療炎癥誘導的腦部疾病的方向。TNF-α在狼瘡腦病中的作用機制尚不明確，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累所引起的神經(jīng)精神癥狀（認知功能障礙）可能與TNF-α相關。
　　本研究以Wistar大鼠為實驗動物，采用條件恐懼反射實驗、高效液相色譜和免疫熒光染色等方法，探討TNF-α及相關拮抗劑如何影響大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的認知功能及大鼠杏仁核中的谷氨酸水平，膠質細胞活化情況。
　　目的：
　　明確大鼠杏仁核注射TNF-α對學習記憶能力的影響

4、，探討注射TNF-α對腦內谷氨酸水平變化的影響及神經(jīng)膠質細胞是否活化，以及阻斷谷氨酸信號傳導通路可否緩解TNF-α所誘發(fā)的行為功能改變。
　　方法：
　　100只大鼠隨機分成兩組，實驗組杏仁核內微量給予不同濃度的TNF-α，對照組予等量對照液。采用恐懼條件反射實驗檢測大鼠的行為學指標。實驗后取材，用高效液相色譜法及免疫組化染色，對比兩組杏仁核內谷氨酸水平變化及膠質細胞活化情況。并予MK-801提前注射阻斷TNF-α，檢測大鼠

5、的行為學變化。
　　結果：
　　1、聽覺恐懼條件反射
　　習慣化實驗中，所有組的大鼠表現(xiàn)出低水平的僵直時間，差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）;條件性實驗中，對照組僵直時間比顯著高于實驗組，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01);消退實驗中，實驗組僵立時間比較對照組顯著增加(p＜0.01)。
　　2、TNF-α注射對杏仁核區(qū)的GABA和谷氨酸水平的影響
　　兩組杏仁核區(qū)的GABA水平無顯著差異（p＞0.05）。相反

6、，谷氨酸水平差異顯著，有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)，但對比3個不同濃度的TNF-α實驗組無顯著性差異（p＞0.05）。
　　3、阻斷NMDA受體可以緩解因TNF-α引起的恐懼學習障礙
　　MK-801+TNF-α組僵直時間比在條件實驗中顯著高于PBS+TNF-α組，而在消退實驗中卻較低，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)。MK-801+TNF-α和MK-801組在兩個實驗中差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。
　　結論：<