TNF-α對(duì)聽覺恐懼條件反射功能的影響及相關(guān)機(jī)制.pdf

1、前言：
　　在炎癥感染過(guò)程中，免疫細(xì)胞產(chǎn)生大量的促炎因子，作用于大腦引起認(rèn)知功能障礙。腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor alpha，TNF-α)是重要的促炎因子之一。狼瘡腦?。↙upus Encephalopathy，LE）患者腦脊液中的TNF-α水平顯著增高，TNF-α可能在LE中扮演著重要角色，TNF-α在LE中的作用機(jī)制也越來(lái)越受到關(guān)注。
　　大腦記憶的形成是突觸可塑性的過(guò)程，大量文獻(xiàn)報(bào)道T

2、NF-α對(duì)學(xué)習(xí)和記憶產(chǎn)生不利影響。在生理?xiàng)l件下，谷氨酸對(duì)突觸可塑性、學(xué)習(xí)和發(fā)育是非常重要的，過(guò)多的谷氨酸誘發(fā)神經(jīng)興奮性中毒，并與多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過(guò)程相關(guān)。TNF-α促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞釋放谷氨酸，過(guò)量的谷氨酸釋放，通過(guò)過(guò)度刺激神經(jīng)元上的門冬氨酸受體(NMDAR)發(fā)揮其神經(jīng)毒性作用。因此，過(guò)量的谷氨酸引起的神經(jīng)毒性可能就是TNF-α引起學(xué)習(xí)和記憶能力障礙的機(jī)制。應(yīng)用MK-801阻斷NMDAR，進(jìn)而控制谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)可能是一個(gè)

3、潛在的治療炎癥誘導(dǎo)的腦部疾病的方向。TNF-α在狼瘡腦病中的作用機(jī)制尚不明確，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累所引起的神經(jīng)精神癥狀（認(rèn)知功能障礙）可能與TNF-α相關(guān)。
　　本研究以Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采用條件恐懼反射實(shí)驗(yàn)、高效液相色譜和免疫熒光染色等方法，探討TNF-α及相關(guān)拮抗劑如何影響大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的認(rèn)知功能及大鼠杏仁核中的谷氨酸水平，膠質(zhì)細(xì)胞活化情況。
　　目的：
　　明確大鼠杏仁核注射TNF-α對(duì)學(xué)習(xí)記憶能力的影響

4、，探討注射TNF-α對(duì)腦內(nèi)谷氨酸水平變化的影響及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是否活化，以及阻斷谷氨酸信號(hào)傳導(dǎo)通路可否緩解TNF-α所誘發(fā)的行為功能改變。
　　方法：
　　100只大鼠隨機(jī)分成兩組，實(shí)驗(yàn)組杏仁核內(nèi)微量給予不同濃度的TNF-α，對(duì)照組予等量對(duì)照液。采用恐懼條件反射實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠的行為學(xué)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)后取材，用高效液相色譜法及免疫組化染色，對(duì)比兩組杏仁核內(nèi)谷氨酸水平變化及膠質(zhì)細(xì)胞活化情況。并予MK-801提前注射阻斷TNF-α，檢測(cè)大鼠

5、的行為學(xué)變化。
　　結(jié)果：
　　1、聽覺恐懼條件反射
　　習(xí)慣化實(shí)驗(yàn)中，所有組的大鼠表現(xiàn)出低水平的僵直時(shí)間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）;條件性實(shí)驗(yàn)中，對(duì)照組僵直時(shí)間比顯著高于實(shí)驗(yàn)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01);消退實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組僵立時(shí)間比較對(duì)照組顯著增加(p＜0.01)。
　　2、TNF-α注射對(duì)杏仁核區(qū)的GABA和谷氨酸水平的影響
　　兩組杏仁核區(qū)的GABA水平無(wú)顯著差異（p＞0.05）。相反

6、，谷氨酸水平差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)，但對(duì)比3個(gè)不同濃度的TNF-α實(shí)驗(yàn)組無(wú)顯著性差異（p＞0.05）。
　　3、阻斷NMDA受體可以緩解因TNF-α引起的恐懼學(xué)習(xí)障礙
　　MK-801+TNF-α組僵直時(shí)間比在條件實(shí)驗(yàn)中顯著高于PBS+TNF-α組，而在消退實(shí)驗(yàn)中卻較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。MK-801+TNF-α和MK-801組在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。
　　結(jié)論：<