小麥條銹菌異核現(xiàn)象研究及SSR分子標(biāo)記建立.pdf

1、小麥條銹病是由小麥條銹菌引起的小麥葉部病害，該病害發(fā)生面積廣，流行頻率高，危害嚴(yán)重。我國(guó)小麥條銹病流行體系是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的體系。目前，防治小麥條銹病主要是使用抗病品種和化學(xué)防治，但不論是利用抗病品種還是化學(xué)防治，都必須快速及時(shí)了解小麥條銹菌生理小種的動(dòng)態(tài)或毒性變異趨勢(shì)。關(guān)于體細(xì)胞重組(異核作用)前人有了一些初步研究，但到底是否可通過(guò)體細(xì)胞重組導(dǎo)致毒性變異沒(méi)有確切的理論依據(jù)。本研究利用10個(gè)菌系以及白化菌進(jìn)行了體細(xì)胞重組產(chǎn)生新菌系的篩選。

2、并利用24對(duì)SSR引物對(duì)異核菌系和我國(guó)小麥條銹菌主要流行小種進(jìn)行了DNA多態(tài)性分析。 1.在進(jìn)行異核菌系篩選過(guò)程中，有四個(gè)組合篩選出了異核菌系。即1號(hào)菌系、2號(hào)菌系、3號(hào)菌系、4號(hào)菌系。新菌系的毒性特征明顯不同于對(duì)應(yīng)原始菌系。在利用SSR引物RJ24對(duì)穩(wěn)定的4號(hào)異核菌系進(jìn)行分析后，獲悉新菌系是通過(guò)核的重新組合分配后體細(xì)胞雜交(即菌系融合、異核作用)的結(jié)果。從分子水平上進(jìn)一步證實(shí)了該新菌系是由兩個(gè)原始菌系經(jīng)過(guò)異核作用產(chǎn)生的。

3、 2.利用RJ3引物對(duì)所選取的15個(gè)小麥條銹菌生理小種和三個(gè)國(guó)外菌系進(jìn)行了DNA多態(tài)性的分析，可以得到白化菌系不同于其它供試小種的170bp左右的特異性擴(kuò)增片段，經(jīng)過(guò)參試菌系的重復(fù)驗(yàn)證，該特異性片段能穩(wěn)定清晰再現(xiàn)。為后期研究顏色變異或無(wú)毒基因提供了參考。 3.利用SSR引物RJ18對(duì)17個(gè)小麥條銹菌生理小種21個(gè)菌系進(jìn)行DNA多態(tài)性分析，在CY26小種上獲得了300bp左右特異性擴(kuò)增片段。進(jìn)一步對(duì)該片段進(jìn)行了驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)該片段仍

4、僅存在于CY26小種上，初步結(jié)果表明RJ18引物可以用于CY26的檢測(cè)。 4.利用SSR引物RJ4引物對(duì)17個(gè)小種23個(gè)菌系進(jìn)行DNA多態(tài)性分析，獲得了CY29小種的210bp左右的特異性譜帶，經(jīng)過(guò)參試菌系的重復(fù)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，該片段能夠在CY29上穩(wěn)定存在，初步表明RJ4引物可以用于CY29的檢測(cè)。5.利用引物RJ20對(duì)11個(gè)小麥條銹菌生理小種進(jìn)行篩選時(shí)獲得長(zhǎng)度約為310bp的可能與Yr9毒性譜相關(guān)的特異帶。經(jīng)過(guò)參試菌系的重復(fù)驗(yàn)證發(fā)