苦豆子提取物對腸癌細胞株受體酪氨酸激酶EphA1的影響.pdf

1、目的：
　　探討苦豆子提取物對人腸癌細胞株HCT-116的抗增殖及誘導凋亡的效果，及其對受體酪氨酸激酶家族成員EphA1基因表達的影響，為中醫(yī)藥進一步提高治療腸癌療效提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　使用四甲基偶氮唑藍(MTT)法，加入終濃度分別為：0.6mg/mL，0.9mg/mL，1.2mg/mL，1.5mg/mL，1.8mg/mL，2.1mg/mL的苦豆子提取物，計算細胞生長抑制率，測定IC50值；分別用1.2mg

2、/mL，1.5mg/mL苦豆子提取物及空白培養(yǎng)基處理48小時后，使用流式細胞法(FCM)檢測苦豆子提取物對人腸癌HCT116細胞生長抑制和誘導凋亡作用；Western Blot檢測EphA1基因蛋白的表達，處理組給予苦豆子提取物IC50濃度，即1.2mg/ml，分別于48及72小時收集細胞，提取細胞總蛋白，抗體孵育后，于成像系統(tǒng)上檢測蛋白條帶，用Quantity one軟件進行蛋白條帶灰度分析。并進行相關統(tǒng)計學分析。
　　結果：<

3、br>　　1.不同濃度苦豆子提取物作用于人腸癌細胞株 HCT116后，與對照組比較細胞生長明顯受到抑制(P<0.05)，其 IC50為1.2mg/ml，并有良好的量效關系；
　　2.流式細胞法顯示，細胞凋亡百分率隨著藥物作用濃度的增加而增加；
　　3.Western blot實驗顯示苦豆子提取物分別作用于HCT116細胞48h，72h EphA1的蛋白表達隨著苦豆子提取物作用時間的延長，出現(xiàn)了先增高，后降低的表達趨勢。不同時