高強(qiáng)度聚焦超聲不完全消融對(duì)體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：通過(guò)高強(qiáng)度聚焦超聲不完全消融篩選殘留肝癌細(xì)胞亞系，探討其生物學(xué)行為改變及其對(duì)血管形成的影響。
　　方法：在聲功率5W下，HIFU消融肝癌細(xì)胞懸液，獲得相應(yīng)的溫度-時(shí)間曲線(xiàn)，通過(guò)細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)篩選出最佳溫度下的不完全消融肝癌細(xì)胞亞系，繼續(xù)培養(yǎng)獲得穩(wěn)定子代。細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖活力及熱耐受性，肝癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的變化通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)鑒別；通過(guò)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞活力、遷移能力及管腔成形能力了解肝癌細(xì)

2、胞亞系對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的影響，并通過(guò) RT-PCR和Western-Blot檢測(cè)肝癌細(xì)胞亞系VEGF mRNA和蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果：隨著HIFU消融時(shí)間增加, SMMC7721肝癌細(xì)胞懸液溫度增加,細(xì)胞死亡率增加，在45℃-47℃之間，肝癌細(xì)胞死亡率逐漸增加，而殘留的肝癌細(xì)胞能存活并繼續(xù)增殖，在48℃及以上溫度肝癌細(xì)胞在24h內(nèi)全部死亡，從而得到生存界限溫度閾值47℃，此溫度下篩選出的SMMC7721肝癌細(xì)胞亞系增殖率、熱耐受性較