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文檔簡介
1、膽囊膽固醇結石病(膽石?。┦且环N常見病,多發(fā)病,其發(fā)病機制目前為止尚未完全明確,有待進一步研究探索。隨著生活水平的提高,伴隨脂質代謝紊亂導致的疾病增多,膽結石發(fā)病率也逐年增加。目前,膽固醇逆轉運(Reversecholesterol transport,RCT)是一個重要的研究課題,本實驗旨在通過研究脂質轉運的重要調節(jié)蛋白三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ATP binding cassette transportA1,ABCA1)和反映周圍
2、組織脂質代謝狀況的巨噬細胞在膽囊壁的表達水平,探討膽囊壁的脂質吸收轉運功能和膽石病的發(fā)病機制。 目的: 1、觀察ABCA1在不同膽囊病理標本中的表達和分布,探討其與膽囊壁脂質轉運的關系。 2、觀察在不同膽囊病理標本中CD68陽性的巨噬細胞分布、形態(tài)、密度和排列規(guī)律,分析其在膽囊壁脂質轉運中的作用。 3、比較ABCA1在膽囊膽固醇結石病人與對照組膽囊粘膜中的表達水平,分析其與膽固醇結石形成之間的關系。
3、 4、比較CD68在膽囊膽固醇結石病人與對照組膽囊壁中的表達水平,分析其與膽固醇結石形成之間的關系。 5、比較ABCA1、CD68在膽囊膽固醇結石病人與對照組膽囊壁中的表達水平,分析ABCA1和CD68在膽囊壁脂質轉運中的相關性,進一步探討膽囊膽固醇結石的發(fā)病機制。 方法: 1、標本收集收集膽囊術后的病理標本。 1.1實驗組:膽囊膽固醇結石病人34例,非結石性慢性膽囊炎合并肝膽管結石11例,膽固醇息肉8
4、例,膽囊結石并急性膽囊炎6例。 1.2對照組:選擇非膽囊結石病人膽囊標本15例,病理診斷均為正常或接近正常膽囊。 1.3所有病例均由HE染色光鏡下獲得病理診斷,無其他合并癥及明顯肝功能異常。 2、實驗方法。石蠟切片脫蠟至水,采用PV-9000即用型二步法免疫組織化學染色檢測ABCA1、CD68在實驗組和對照組膽囊標本中的表達,ABCA1、CD68單克隆抗體的工作濃度均為1:200,以PBS代替一抗作陰性對照。
5、 3、統(tǒng)計處理。結果采用半定量積分法評判,數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,行X2檢驗。 結果: 1、ABCA1的表達及分布。 1.1 ABCA1主要在膽囊粘膜上皮細胞頂側表達,上皮細胞的基底側、粘膜下層、肌層及漿膜層無明顯表達。 1.2膽囊膽固醇結石病人的膽囊粘膜ABCA1表達低于對照組膽囊粘膜的表達,兩組進行半定量分析,具有統(tǒng)計學意義P<0.005。 1.3膽固醇息肉組、膽囊結石并急性膽囊炎組的ABCA
6、1表達降低;與對照組比較有統(tǒng)計學差異。 1.4非結石性慢性膽囊炎合并肝膽管結石組的ABCA1表達升高,與對照組比較無統(tǒng)計學差異。 2、CD68的表達及分布。 2.1 CD68主要在膽囊粘膜上皮細胞頂側表達,胞漿著色,細胞形態(tài)為細顆粒狀,呈密集分布;粘膜下層細胞大且為圓形或橢圓形,連接成片;肌層及漿膜層有散在分布,量少,細胞中等大小。 2.2膽囊膽固醇結石病人的膽囊粘膜CD68表達高于對照組膽囊粘膜的表達,
7、兩組進行半定量分析,具有統(tǒng)計學意義P<0.05。 2.3非結石性慢性膽囊炎合并肝膽管結石組、膽固醇息肉組CD68表達升高,與對照組比較有統(tǒng)計學差異。 3、ABCA1、CD68兩因素間比較。 3.1膽囊膽固醇結石組和膽固醇息肉組病人ABCA1表達降低,CD68表達升高,差異具有統(tǒng)計學意義P<0.05。 3.2非結石性慢性膽囊炎合并肝膽管結石組ABCA1、CD68陽性表達均升高,無統(tǒng)計學差異。 4、陰
8、性對照無表達。 結論: 1、ABCA1、CD68主要在膽囊粘膜上皮細胞頂側表達,說明膽囊粘膜上皮細胞具有吸收和轉運脂質的功能。 2、ABCA1在膽固醇結石病人膽囊粘膜上皮細胞中表達減弱,可能在膽石病發(fā)病機制中起一定作用。 3、CD68在膽固醇結石病人膽囊粘膜上皮細胞中表達增強,與膽囊壁的脂質轉運和膽結石的形成有關。 4、ABCA1與CD68在膽囊壁中的表達呈副相關性,脂質調節(jié)蛋白ABCA1功能的下
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