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文檔簡(jiǎn)介
1、帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)為一種困擾許多中老年人的常見病,至今還沒有一種有效的治療方法能阻止該病的進(jìn)展。近年來,隨著對(duì)該疾病研究的深入,免疫炎癥機(jī)制已成為研究PD發(fā)病機(jī)制的又一熱點(diǎn),一系列炎癥反應(yīng)因子,包括TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB等,均在PD患者的腦脊液中或受影響的腦區(qū)被發(fā)現(xiàn)有所改變。目前對(duì)帕金森病的應(yīng)用基礎(chǔ)研究多廣泛采用6-OHDA誘導(dǎo)的PD大鼠模型,該模型是否能夠模擬炎癥過程,即其黑質(zhì)
2、多巴胺能神經(jīng)元損傷過程是不是同樣存在與人類患者相似的炎癥過程,目前尚無明確證據(jù)。因此,本實(shí)驗(yàn)研究觀察該模型中重要的炎癥因子,TNF-α、IL-6、NF-κB水平的改變,為采用該模型研究PD的發(fā)病機(jī)制及治療方法提供依據(jù)。
1、方法:
(1)取SD(SpragueDawley)大鼠,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組,每組又分1,7,14,21d亞組,在實(shí)驗(yàn)組大鼠左側(cè)紋狀體內(nèi)注射6-OHDA,對(duì)照組注射等量生理鹽水;
(2
3、)術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)觀察各亞組經(jīng)阿樸嗎啡(Apomorphine,APO)誘導(dǎo)后大鼠旋轉(zhuǎn)行為的改變;
(3)術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)各亞組取腦組織行免疫組織化學(xué)染色,觀察黑質(zhì)多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元數(shù)量變化;
(4)術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)各亞組用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定大鼠中腦黑質(zhì)組織勻漿中TNF-α、IL-6的水平;
(5)術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)各亞組行腦組織行免疫組織化學(xué)染色觀察紋狀體NF-κBp65的表達(dá)改變。
4、r> 2、結(jié)果:
(1)成功構(gòu)建6-OHDA誘導(dǎo)的PD大鼠模型;
(2)實(shí)驗(yàn)組大鼠術(shù)后7d出現(xiàn)不同程度向健側(cè)緩慢旋轉(zhuǎn)(3.25±0.76)次/分,14d旋轉(zhuǎn)次數(shù)增多(8.42±1.25)次/分,21d達(dá)到高峰(11.98±2.52)次/分;對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)現(xiàn)向健側(cè)旋轉(zhuǎn);
(3)實(shí)驗(yàn)組注射側(cè)黑質(zhì)酪氨酸羥化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量1,7,14,21d組較對(duì)照組明顯下
5、降(P<0.01),且其數(shù)目的減少隨時(shí)間延長(zhǎng)而愈加顯著,21d時(shí)下降到最低;
(4)實(shí)驗(yàn)組從6-OHDA注射后1d始到21dTNF-α、IL-6水平較對(duì)照組持續(xù)增高;
(5)實(shí)驗(yàn)組從6-OHDA注射后1d始到21dNF-κBp65的表達(dá)較對(duì)照組持續(xù)增強(qiáng)。
3、結(jié)論:
在6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森病大鼠模型中炎癥因子TNF-α、IL-6、NF-κB的表達(dá)升高,這種升高很可能參與腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的損
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