舟山眼鏡蛇毒CTXn對6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森病動物模型的療效觀察.pdf

1、目的：
　　 1、探討通過完全損傷黑質(zhì)建立帕金森病（PD）異動癥動物模型的可行性。
　　 2、研究舟山眼鏡蛇毒CTXn對PD動物模型的治療效果。
　　 方法：
　　 1、分別運(yùn)用大劑量和中劑量6-OHDA建立黑質(zhì)完全損傷和部分損傷的動物模型；以轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)（Rota Rod Test）和圓筒試驗(yàn)（Cylinder Test）評估模型大鼠運(yùn)動功能；運(yùn)用異常不自主運(yùn)動（AIM）評分方法評估左旋多巴（L-DOPA）

2、誘導(dǎo)的模型大鼠的異動行為；通過免疫組織化學(xué)染色檢測模型大鼠的黑質(zhì)TH陽性細(xì)胞；運(yùn)用高效液相檢測模型大鼠的紋狀體多巴胺含量。
　　 2、通過大劑量6-OHDA完全損傷黑質(zhì)建立PD異動癥模型，運(yùn)用CTXn（安慰劑對照用生理鹽水）進(jìn)行預(yù)處理，然后運(yùn)用轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)評測大鼠運(yùn)動協(xié)調(diào)能力，運(yùn)用L-DOPA誘導(dǎo)大鼠發(fā)生的異常不自主運(yùn)動（AIM）行為。
　　 3、通過中劑量6-OHDA部分損傷黑質(zhì)建立PD模型，運(yùn)用尼古丁或/和 CTXn進(jìn)行

3、預(yù)處理，然后運(yùn)用轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)評測模型大鼠的運(yùn)動協(xié)調(diào)能力、運(yùn)用APO誘導(dǎo)模型大鼠發(fā)生旋轉(zhuǎn)行為。
　　 4、通過中劑量6-OHDA部分損傷黑質(zhì)建立PD模型，運(yùn)用CTXn（安慰劑對照組用生理鹽水）連續(xù)腹腔注射2周，然后運(yùn)用轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)評測模型大鼠的運(yùn)動協(xié)調(diào)能力、運(yùn)用APO誘導(dǎo)模型大鼠發(fā)生旋轉(zhuǎn)行為，再行免疫組化染色觀察紋狀體ChAT陽性細(xì)胞、多巴胺D2受體陽性細(xì)胞和黑質(zhì)TH陽性細(xì)胞數(shù)量。
　　 結(jié)果：
　　 1、大劑量6-OHD

4、A建立黑質(zhì)完全損傷動物模型的成功率為71％，死亡率為7％。
　　 2、黑質(zhì)完全損傷大鼠模型在Rota Rod試驗(yàn)轉(zhuǎn)棒上的滯留時間為假手術(shù)對照組的55.3％；在圓筒試驗(yàn)中損傷側(cè)前肢觸壁次數(shù)占雙側(cè)觸壁總數(shù)的比例為19.6％；在首次給予L-DOPA或APO誘導(dǎo)下，均可表現(xiàn)出AIM行為，AIM評分隨L-DOPA劑量的增加而上升；損傷側(cè)黑質(zhì)TH陽性細(xì)胞丟失達(dá)98％以上，其紋狀體內(nèi)多巴胺DA的含量為對側(cè)的0.94％。
　　 3、對于

5、異動癥大鼠模型，CTXn降低了L-DOPA誘導(dǎo)的各項(xiàng)AIM行為評分，同時，CTXn急性干預(yù)對正常大鼠和異動癥模型均沒有明顯降低其運(yùn)動能力。
　　 4、對于PD大鼠模型，尼古丁顯著降低了模型大鼠運(yùn)動協(xié)調(diào)能力，而CTXn不影響尼古丁的作用；CTXn急性干預(yù)降低了模型大鼠運(yùn)動協(xié)調(diào)能力、減少了APO誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)行為；CTXn慢性干預(yù)2周后模型大鼠的運(yùn)動協(xié)調(diào)能力有所改善；CTXn慢性干預(yù)2周后，損傷側(cè)紋狀體區(qū)多巴胺D2受體陽性細(xì)胞的表達(dá)明顯