一毛殼菌菌株的分離鑒定及生物防治潛力研究.pdf

1、毛殼菌(Chaetomiumspp.)是國(guó)內(nèi)外廣泛使用的生物防治菌，對(duì)植物病原菌具有很好的防治效果，但它和其它生物防治菌一樣對(duì)化學(xué)殺菌劑敏感，無(wú)法和化學(xué)殺菌劑在植物病害綜合防治體系中共同發(fā)揮作用。本文對(duì)從撐綠雜交竹上篩選出的一株毛殼菌進(jìn)行了菌種鑒定，生物學(xué)特性，殺菌劑毒力和拮抗能力等系列研究，為進(jìn)一步提高該毛殼菌的生物防治效果，構(gòu)建既對(duì)殺菌劑抗性穩(wěn)定，又能顯著抑制植物病原真菌的毛殼菌基因工程菌株提供依據(jù)。推動(dòng)生物防治與化學(xué)防治的結(jié)合，實(shí)

2、現(xiàn)綜合防治思想，促進(jìn)高效生態(tài)林業(yè)的發(fā)展。主要研究結(jié)果如下： 從雜交竹上分離篩選，對(duì)該菌進(jìn)行培養(yǎng)觀察，主要依據(jù)該菌的菌落、子囊殼、附屬絲、子囊及子囊孢子的形態(tài)特征和量度，進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，與目前查閱范圍內(nèi)的近20種分析比較，結(jié)果該菌在形態(tài)特征或量度上均存在差異，且該菌在國(guó)內(nèi)竹類植物內(nèi)生菌分離上還未曾見(jiàn)有報(bào)道，故暫定為竹毛殼菌(Chaetomiumsp.)。 該竹毛殼菌在雜交竹上帶菌率存在季節(jié)、組織部位與年齡差異。以夏、秋季出現(xiàn)

3、頻率較高，秋季為最高，冬季最低；1年生幼嫩雜交竹竹稈組織上出現(xiàn)的頻率明顯低于多年生雜交竹組織；在沿竹徑向半徑上依次取組織分離結(jié)果該菌帶菌率從外部到內(nèi)部依次減少。 不同培養(yǎng)基培養(yǎng)表明竹稈煎汁對(duì)該毛殼菌生長(zhǎng)、產(chǎn)孢速度及產(chǎn)孢量均有促進(jìn)作用；同等條件下含蔗糖的培養(yǎng)基對(duì)菌的生長(zhǎng)和繁殖都優(yōu)于含葡萄糖的培養(yǎng)基。在5～40℃的不同溫度下培養(yǎng)，結(jié)果表明該毛殼菌生長(zhǎng)適宜生長(zhǎng)溫度為20～30℃，最適宜為25℃左右，低于5℃或超過(guò)40℃生長(zhǎng)不好，甚至停

4、止生長(zhǎng)。在pH值為5～11的PSA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，結(jié)果表明該毛殼菌生長(zhǎng)對(duì)pH值的適宜范圍較大，影響不顯著。在通氣性和光照處理26℃恒溫培養(yǎng)，結(jié)果表明該內(nèi)生毛殼菌對(duì)光照敏感，全光照和全黑暗條件下生長(zhǎng)差異不大，半光照半黑暗下較差，而對(duì)通氣狀況要求不嚴(yán)格。 殺菌劑毒力測(cè)定表明該毛殼菌在不含殺菌劑的PSA培養(yǎng)基上能正常生長(zhǎng)，但當(dāng)PSA培養(yǎng)基中含0.10，0.25，0.50，1.00，2.00mg/L不同濃度的6種殺菌劑時(shí)，毛殼菌均受到不同

5、程度的抑制。毛殼菌對(duì)甲基托布津和代森錳鋅非常敏感，有效抑制中濃度EC50分別為1.2572mg/L和1.9138mg/L，而地菌靈則效果最差，有效抑制中濃度EC50為779.4711mg/L，敏感程度依次為甲基托布津＞代森錳鋅＞多菌靈＞三環(huán)唑＞百菌克＞地菌靈。 研究表明該毛殼菌拮抗能力較強(qiáng)，在對(duì)峙培養(yǎng)時(shí)病原菌在與毛殼菌的相向生長(zhǎng)半徑上受到明顯地抑制，作用機(jī)制可能是產(chǎn)生拮抗物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)。毛殼菌對(duì)植物病原菌大麗輪枝霉(Vertic

6、illiumdahliae)抑制效果最好，可覆蓋其菌落，最終使其消亡；其次是串珠鐮刀菌(Fusariummoniliforme)，交接后相向生長(zhǎng)停止，串珠鐮刀菌菌落萎縮消退；然后是紋枯病菌(RhizoctorniasolaniAG-4)和核盤菌(Scleroliniascleroliorum)，交接后毛殼菌只能抵抗其擴(kuò)展。而對(duì)立枯絲核菌(Rhizoctorniasolani)雖然有一定的抑制作用，但拮抗效果不理想。與生防菌哈茨木霉(Tr