急性冷應激大鼠組織和細胞熱休克蛋白90表達及應激性損傷機理研究.pdf

1、研究背景：突如其來的大雪和冰凍等極端氣候使機體產(chǎn)生強烈的冷應激反應。應激性損傷受到廣泛關注。冷刺激時神經(jīng)內(nèi)分泌激素水平發(fā)生改變，釋放大量兒茶酚胺和糖皮質激素，使內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變，生理功能紊亂。這些應激激素水平的升高，既能反映應激的嚴重程度，同時能影響機體的炎癥免疫反應。熱休克蛋白90(HSP90)是重要的應激性蛋白之一，應激反應時迅速合成并激活，在蛋白質聚集、折疊、跨膜、運輸和轉位、穩(wěn)定細胞骨架以及分子伴侶等方面發(fā)揮著重要的調節(jié)作用，抵抗

2、早期應激性損傷。HSP90表達的增強，反映了機體適應和保護機制發(fā)揮作用，同時也說明應激可能造成了細胞功能受損。但目前較少研究通過系統(tǒng)觀察組織細胞HSP90的表達評價機體冷應激性損傷程度。
　　 應激原的作用下HSPs可以“主動”分泌出胞或者由壞死細胞釋放到細胞外作為損傷相關模式分子(DAMPs)介導炎癥免疫反應，造成組織細胞的“二次損傷”。有研究中發(fā)現(xiàn)，重癥創(chuàng)傷后，糖皮質激素(GC)分泌增多，肝臟糖皮質激素受體(GR)減少時HS

3、P70表達增加，以對抗GR下降所致的臟器損害，但機體出現(xiàn)炎癥反應失控，發(fā)生明顯的繼發(fā)性損害。研究發(fā)現(xiàn)釋放到細胞外HSP70，可能作為免疫系統(tǒng)的危險信號(danger signal)，改變免疫微環(huán)境，與抗原遞呈細胞相互作用而誘導免疫反應，或是與單核細胞表面的TLR4受體結合，啟動先天性免疫應答，促進TNF-a、IL-6分泌，誘發(fā)機體炎癥反應。在冠狀動脈粥樣硬化的研究發(fā)現(xiàn)，不穩(wěn)定斑塊中HSP60可作為抗原，誘導特異性T淋巴細胞的亞型CD28

4、克隆發(fā)生改變，增殖成一群功能多樣的CD4+CD28-T淋巴細胞。在自身免疫性疾病研究中發(fā)現(xiàn)CD4+CD28-T是一類具有天然殺傷靶細胞作用，且能抗自身細胞凋亡長壽的T細胞。目前CD4+CD28-T細胞的產(chǎn)生機制不明確，推測可能是由有限數(shù)量的抗原刺激產(chǎn)生，尋找誘導CD4+CD28-T淋巴細胞增殖的抗原具有重要的臨床意義。有學者提出在應激損傷的過程中，細胞外的HSPs作為“交通樞紐”影響和放大周圍細胞的炎癥免疫損傷，但是目前分泌和調節(jié)機制不

5、明，于是提出HSPs在應激性損傷中作用有廣闊的研究空間。最近的研究發(fā)現(xiàn)，用H2O2作用內(nèi)皮細胞后在培養(yǎng)液中檢測到可溶性的HSP90，內(nèi)皮細胞的HSP90表達升高，加入T淋巴細胞培養(yǎng)后檢測到炎癥因子表達升高，推測HSP90可能也是DAMP。但是更深入的研究目前未見相關報道。因此本研究探討在急性冷應激中異常升高的HSP90，參與急性冷應激主動脈內(nèi)皮細胞損傷的機制。
　　 研究通過觀察急性冷刺激的不同時間HSP90在大鼠主動脈、脾臟和

6、心肌組織、淋巴細胞的蛋白表達和血漿濃度的動態(tài)變化，從蛋白分子的角度闡述大鼠急性冷應激的損傷過程。通過研究外源性HSP90誘導急性冷刺激后主動脈內(nèi)皮細胞炎性因子表達機制，探討HSP90啟動TLR-4介導的先天性免疫反應，參與大鼠急性冷應激后主動脈內(nèi)皮細胞損傷。通過觀察外源性的HSP90介導，急性冷刺激后大鼠脾臟樹突狀細胞成熟和抗原遞呈功能增強，及脾臟T淋巴細胞激活和亞型的改變。以及HSP90特異性的細胞毒性T細胞對大鼠主動脈內(nèi)皮細胞的損傷

7、作用。并進一步觀察HSP90作為免疫抗原能誘導具有細胞毒性作用的CD4+CD28-T淋巴細胞增殖。探討HSP90通過抗原提呈激活獲得性免疫反應參與大鼠急性冷刺激后主動脈內(nèi)皮細胞損傷的機制。
　　 一、大鼠急性冷應激反應中激素、HSP90的動態(tài)變化及應激性損傷模型建立
　　 通過系統(tǒng)觀察冷刺激的不同時間及冷刺激后的不同時間大鼠血漿兒茶酚胺和激素濃度的改變，檢測大鼠心肌組織、胸主動脈、脾臟和外周血淋巴細胞以及血漿中HSP90

8、的動態(tài)變化。觀察在冷應激性損傷模型建立過程中，大鼠主動脈組織HSP90與GR蛋白的表達。為進一步探討HSP90參與大鼠急性冷應激主動脈內(nèi)皮細胞損傷機制提供實驗依據(jù)。
　　 1.大鼠急性冷應激反應中血漿兒茶酚胺和激素的動態(tài)變化
　　 方法：大鼠在-4℃氣候箱中冷刺激1h、3h、6h、12h、24h五個不同的時間，以及在每個時間點停止冷刺激后置于24℃環(huán)境中進一步觀察即刻(0h)、1h、12h、24h四個時間點。采用放射免疫

9、分析法(ELSA)，檢測各個時間點大鼠血漿腎上腺素(E)和去甲腎上腺素(NE)，促腎上腺素(ACTH)和糖皮質激素(Cor)濃度。
　　 結果：-4℃冷刺激6h開始大鼠血漿E和NE濃度開始升高，12h達峰值，E和NE濃度分別是(9.11±0.52ng/ml；12.12±0.37pg/ml)比正常值(4.91±0.12ng/ml；3.13±0.12pg/ml)明顯升高(P<0.01)，以后逐漸下降，24h恢復期到正常。ACTH在6

10、h時達峰(22.4±0.62 pg/ml)比冷刺激前(12.36±0.33pg/mL)明顯升高(P<0.01)，24h降至冷刺激之前水平。Cor在6h開始升高，12h時達峰值(112.2±0.82ng/ml)明顯高于應激前(70.12±0.23ng/ml)水平(P<0.01)。冷刺激結束后各個時間點觀察E和NE的濃度變化不大。ACTH血漿濃度在冷刺激12h停止冷刺激后的1h(18.14±0.81pg/mL)高于冷刺激前水平(P<0.05

11、)，在12h和24h時無明顯升高。而Cor血漿濃度在冷刺激12h停止冷刺激后的12h和24h(133.14±0.52；121.2±0.28)ng/mL明顯高于冷刺激前(70.12±0.23 ng/ml)水平(P<0.01)。大鼠急性冷刺激12h，兒茶酚胺和激素水平均明顯升高，在停止冷刺激后，Cor血漿濃度仍然較高，且Cor與ACTH濃度升高不一致，推測Cor升高可能不完全依賴于下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸的調節(jié)，可能與HSP90的表達增強

12、和糖皮質激素受體減少有關。
　　 2.HSP90在急性冷應激大鼠血漿、組織和細胞中的動態(tài)變化
　　 方法：采用Western_blotting方法檢測大鼠急性冷應激反應中心肌組織、胸主動脈、脾臟和外周血淋巴細胞HSP90的蛋白表達，將蛋白表達膠片進行掃描，用Sicon Image J軟件對Western b10t條帶進行灰度分析，然后計算蛋白相對含量：蛋白相對含量=(HSP90/β-actin)；用ELISA法檢測血漿H

13、SP90濃度。
　　 結果：在冷刺激3h時，心肌組織中的HSP90蛋白表達量明顯升高，在3h、6h、12h表達量(1.2±0.02；1.1±0.17；1.05±0.01)比冷刺激前明顯升高(P<0.01)，隨后接近正常水平；大鼠主動脈組織中HSP90表達在冷刺激6h開始升高，12h和18h表達量(1.5±0.05；1.4±0.06)比冷刺激前明顯升高(p<0.05)，24h開始下降但高于正常水平。大鼠淋巴細胞中HSP90的表達量

14、在冷刺激1h就升高，比冷刺激前明顯升高(P<0.05)，在3h雖有所下降，但一直保持較高水平比冷刺激前明顯升高(P<0.05)，在12h和24h時升高更明顯，在12h時達峰值，表達量(1.5±0.13)比冷刺激前顯著升高(P<0.01)。脾臟中HSP90的表達，在冷刺激最初反應較慢，在12h、18h表達量(0.67±0.15；0.6±0.14)比冷刺激前明顯升高(P<0.05)。血漿HSP90濃度，在冷刺激最初時間無明顯改變，在12h(

15、0.61±0.03)ug/ml比冷刺激前明顯升高(P<0.05)，在18h和24h一直在較高的水平。在冷刺激結束后不同的時間點觀察到：冷刺激結束后對心肌HSP90影響不大。而主動脈冷刺激12h結束后，HSP90的表達在6h、12h、24h時間點均處于高水平。血漿淋巴細胞在冷刺激12h結束后HSP90表達量一直處于高水平。脾臟冷刺激12h結束后6h、12h、24h HSP90表達量均明顯高于冷刺激前(P<0.05)，血漿HSP90濃度，冷

16、刺激12h結束后12h明顯升高，一直保持較高的水平，但是在冷刺激24h后各個時間點，血漿HSP90濃度是下降。
　　 3.HSP90和8R在大鼠急性冷應激主動脈內(nèi)皮細胞損傷模型建立中的表達
　　 方法：依據(jù)前面的研究實驗分為四組：冷刺激12h后的即刻，(0h組、12h組、24h組)和冷刺激前組。用光學顯微鏡和透視電鏡觀察大鼠主動脈內(nèi)膜的病理改變，用ELISA法檢測血漿ET、N0和LDH濃度。Western-blottin

17、g方法檢測主動脈HSP90和GR蛋白表達量及相關性分析。
　　 結果：大鼠胸主動脈病理檢查，光鏡可見0h組：內(nèi)膜不光滑，血管壁層次清晰，中膜可見輕度腫脹。但是冷刺激后12h組和24h組，血管腔凹凸不平，內(nèi)膜增厚，中膜可見腫脹，且彈性纖維排列不整齊，但是兩組之間沒有顯著差別；電子透視鏡檢查冷刺激前主動脈內(nèi)膜表現(xiàn)，冷刺激前內(nèi)皮細胞呈梭形、扁平，表面平滑，細胞膜完整；0h組內(nèi)皮細胞細胞膜不完整有破損和缺失，細胞核碎裂、溶解；12h組和

18、24h組內(nèi)皮細胞明顯變大，呈空泡狀連成一片，核固縮。冷刺激12h后的0h組、12h組和24h組：大鼠血漿ET濃度(138.55±5.78；173.24±11.23；168.08±12.12)ng/ml比冷刺激前明顯升高(p<0.01)；12h組和24h組比0h組明顯升高(P<0.05)。N0濃度(45.12±8.27；31.21±8.24；22.45±12.9)umol/L比冷刺激前明顯降低(p<0.01)；12h組和24h組比0h組明

19、顯降低(P<0.05)。LDH濃度(372±13.24；435±21.31；473±12.21)IU/L比冷刺激前明顯升高，(p<0.01)；12h組和24h組比0h組明顯升高(P<0.05)。急性冷刺激12h后大鼠主動脈組織中HSP90的蛋白表達量在0h組表達量為(0.89±0.16)比對照組升高，(p<0.05)。在12h組表達量為(1.23±0.22)和24h組表達量(1.4±0.25)比0h組明顯升高(p<0.01)，兩組之間比

20、較沒有統(tǒng)計學意義。GR在主動脈組織中的蛋白表達量，在0h組為(0.92±0.012)h比對照組表達量明顯升高(p<0.05)。而在12h組和24h組分別為(0.61±0.092；0.42±0.082)比0h組明顯降低(p<0.01)。相關性分析，在冷刺激12h后12h組和24h組HSP90和GR的蛋白表達量呈負相關r=-0.537，p<0.05
　　 第一部分小結：
　　 (1)在冷刺激12h后，糖皮質激素下降緩慢仍保持

21、在較高水平。
　　 (2)在冷刺激12h后主動脈組織，脾臟和外周血淋巴細胞HSP90表達增加，同時HSP90血漿濃度明顯升高。
　　 (3)急性冷刺激12h后12h和24h主動脈組織GR表達量下降，HSP90表達量升高，主動脈內(nèi)皮細胞損傷加重。確定急性冷刺激12h后為本實驗的大鼠主動脈內(nèi)皮細胞損傷模型。
　　 二、外源性HSP90誘導冷應激損傷后大鼠主動脈內(nèi)皮細胞炎癥因子表達的機制
　　 通過觀察外源性H

22、SP90刺激冷應激損傷后大鼠主動脈內(nèi)皮細胞的TLR-4蛋白和TNF-α和IL-6炎性因子mRNA的表達，及TLR-4特異性阻斷抗體干預后HSP90誘導內(nèi)皮細胞炎性細胞因子表達的變化，探討HSP90啟動TLR-4先天性免疫反應參與急性冷應激后主動脈內(nèi)皮細胞損傷。
　　 方法：采用原代培養(yǎng)急性冷刺激后各組主動脈血管內(nèi)皮細胞，用外源性的HSP90刺激血管內(nèi)皮細胞，western-bloting方法檢測各組內(nèi)皮細胞TLR-4蛋白表達，用

23、熒光定量PCR檢測TNF-α和IL-6炎性細胞因子的表達及TLR-4特異性阻斷抗體干預后血管內(nèi)皮細胞釋放TNF-α和IL-6炎性細胞因子表達的變化。用ELISA法檢測細胞液中LDH的濃度。
　　 結果：在急性冷刺激12h后大鼠主動脈組織中在0h組TLR4蛋白表達量為(0.69±0.06)比對照組升高，p<0.05。在12h組表達量為(0.93±0.22)和24h組表達量(0.98±0.25)比對照組明顯升高(p<0.01)；HS

24、P90處理后各組細胞的炎癥因子TNF-a和IL-6mRNA表達量0h組(6.31±0.63和7.31±0.15)倍；12h組分別是(8.24±0.17和10.1±0.11)；24h組(9.12±0.16和11.1±0.15)，各組均上調，比對照組明顯升高(p<0.01)。0h組(422.31±7.53)IU/L；12h組是(568.24±9.17)IU/L；24h組(598.12±9.16)IU/L各組均上調，比對照組明顯升高(p<0.

25、01)。
　　 第二部分小結：
　　 (1)外源性的HSP90誘導冷應激損傷后大鼠主動脈內(nèi)皮細胞TLR4表達升高，且12h組和24h組比對照組TLR4蛋白表達量明顯升高，TNF-a mRNA和IL-6mRNA表達明顯升高，LDH活性升高。
　　 (2)用TLR4特異性抗體阻斷TLR4后，抑制HSP90誘導的各組內(nèi)皮細胞炎性因子TNF-a mRNA和IL-6mRNA表達。
　　 (3)TLR4介導HSP90

26、誘導急性冷刺激后大鼠主動脈內(nèi)皮細胞損傷和炎性因子表達。
　　 三、外源性HSP90介導急性冷應激大鼠主動脈內(nèi)皮細胞自身免疫損傷的機制
　　 通過觀察外源性的HSP90介導冷應激損傷后大鼠脾臟樹突狀細胞(Dendritic cell，DC)成熟和抗原遞呈能力增強，脾臟T淋巴細胞活性和CD4+T淋巴細胞亞型的改變。以及HSP90介導的應激損傷后特異性的細胞毒性T細胞，對大鼠主動脈內(nèi)皮細胞的損傷的作用。并進一步觀察HSP90抗

27、原遞呈能誘導具有細胞毒性作用的CD4+CD28-T淋巴細胞增殖。探討HSP90通過抗原提呈激活獲得性免疫反應，參與大鼠急性冷刺激后主動脈內(nèi)皮細胞損傷機制。
　　 1.外源性HSP90對冷應激損傷后大鼠脾臟樹突狀細胞和T淋巴細胞功能影響
　　 方法：分離培養(yǎng)冷刺激后大鼠脾臟DC和T淋巴細胞。流式細胞儀檢測DC細胞的共同刺激分子CD86百分比，混合淋巴細胞反應(MLR)檢測DC對同種異體T淋巴細胞的刺激能力，通過3H-TdR

28、摻入法，用CPM值表示T淋巴細胞增殖的能力，用ELISA法測定MLR上清液中的IFN-γ，TNF-β，IL-4和IL-10細胞因子。采用3H-TdR摻入法檢測刀豆素(ConA)抗原刺激脾臟T淋巴細胞的增殖，流式細胞術檢測各組CD43、淋巴細胞的亞型以及用ELISA法檢測HSP90與各組T淋巴細胞細胞液中IFN-γ濃度。
　　 結果：①在12h組和24h組的大鼠脾臟DC表面CD86百分比冷刺激前和0h組明顯增高，對同種異體T淋巴細

29、胞刺激增殖的CPM值(26，334±4532；32，34±3127)比冷刺激前組CPM值(8，599±5745)明顯升高(p<0.01)，同時細胞液中細胞因子IFN-γ，TNF-β濃度(12h組，15.6±1.4；16.3±1.1)ng/L(24h組，18.1±2.1；19.0±1.4)ng/L比冷刺激前(6.8±1.1；7.4±1.9)ng/L明顯升高(p<0.01)。②在12h組和24h組的大鼠脾臟T淋巴細胞的CD4CD28-T淋巴

30、細胞(73±10.5；80±11.2)％比冷刺激前百分比明顯升高(p<0.01)。③5.0ug/ml ConA刺激各組大鼠脾臟T淋巴細胞在12h組cmp值=16，520±3421和24h組cmp值=18，230±7812比冷刺激前明顯升高(p<0.01)。④ HSP90與各組T淋巴細胞細胞液中IFN-γ濃度結果：12h組(14.4±1.1)ng/L和24h組(15.8±1.6)ng/L冷刺激前明顯升高(p<0.01)。
　　 2

31、.外源性HSP90誘導CD4+CD28-T增殖的研究
　　 方法：實驗分為，10ug/LHSP90負載DC；20ug/LHSP90負載DC組和對照組。用密度梯度離心法分離人外周血(PBMC)，體外細胞培養(yǎng)觀察HSP90負載DC細胞(HSP90-DC)，免疫磁珠分選技術獲得CD4+T淋巴細胞，用流式細胞儀檢測CD4+T亞型CD28的百分比，ELISA檢測細胞培養(yǎng)液中INF-γ細胞因子的濃度。用realtime RT-PCR，通過循

32、環(huán)閾值(Ct)表達，7300pcr儀器軟件分析結果，用2-ΔΔCt計算mRNA值，檢測HSP90-DC細胞誘導的CD4CD28-T淋巴細胞INF-γ、IL-2、TNF-a和GZMBmRNA值，用CFSE標記結合流式細胞術檢測，流式細胞術百分比來表示CD4CD28-T淋巴細胞對血管內(nèi)皮細胞增殖的影響，流式細胞術檢測阿托伐他汀干預HSP90負載DC細胞對CD4+T淋巴細胞增殖的影響。
　　 結果：①免疫磁珠分選技術獲得CD4+T淋巴

33、細胞純度在(95±1.5)％，HSP90負載DC能誘導CD4+T淋巴細胞CD28表達下，10ug/LHSP90-DC和120ug/LHSP90-DC誘導CD4+CD28-T細胞百分比分別是(65±11.2；70±9.8％)比沒有HSP90負載的DC組誘導CD4+CD28-T細胞百分比(22±7.9)％明顯升高的(p<0.01)，細胞液INF-γ濃度10ug/LHSP90-DC組(14.3±1.26)ng/L和20ug/LHSP90-DC

34、組(15.4±1.15)ng/L比對照組明顯升高(p<0.01)，兩個濃度的HSP90-DC組之間比較沒有差別；②阿托伐他汀抑制HSP90負載DC細胞對CD4+T淋巴細胞增殖的影響，阿托伐他汀組CD4+CD28-T細胞百分比(23.5±5.3)％比未干預組(57.24±2.3)％明顯降低(p<0.01)；細胞液中INF-γ濃度阿托伐他汀組(7.8±0.6)ng/L比未干預組(15.7±0.5)ng/L明顯降低(p<0.01)。③定量PC

35、R檢測HSP90-DC誘導產(chǎn)生的CD4+CD28-T細胞的INF-γ、IL-2、TNF-a、GZMBmRNA表達值比對照組明顯升高(p<0.01)。而且HSP90-DC和CD4+CD28-T淋巴細胞混合組血管內(nèi)皮細胞的增殖(10±11.2)％比對照組內(nèi)皮細胞增殖量(45±15.3)％明顯降低(p<0.01)。
　　 3.HSP90介導冷應激后特異性細胞毒性T細胞對大鼠主動脈內(nèi)皮細胞損傷的研究
　　 方法：分離冷刺激大鼠1

36、2h后0h組、12h組和24h組的脾臟DC和T淋巴細胞，用流式細胞術檢測各組DC刺激自體T淋巴細胞增殖，用MTT法檢測，計算細胞的殺傷率(％)=(效應細胞孔A值+單純靶細胞孔A值-細胞毒實驗孔A值)/單純靶細胞孔A值×100％，檢測各組的DC細胞和自體的T淋巴細胞混合(CTL)對靶細胞大鼠主動脈內(nèi)皮細胞(EC)與負載HSP90-EC細胞殺傷作用的比較；進一步用CFSE標記結合流式細胞術檢測用阿托伐他(Ato)的干預后免疫細胞對內(nèi)皮細胞增

37、殖的影響以及用ELISA法檢測混合細胞液的LDH濃度。
　　 結果：①各組DC刺激自體T淋巴細胞增殖觀察到，冷刺激后12h和24h組的T細胞增殖(19.5±1.5；32±5.4)％比正常對照組(2.8±0.5)％明顯升高(p<0.01)；負載HSP90后的正常組DC刺激自體淋巴細胞增殖(42.1±5.4)％顯著增強(p<0.01)。②12h組和24h組DC細胞和自體的T淋巴細胞混合(CTL)對負載HSP90的內(nèi)皮細胞組的殺傷率(

38、68.3±1.4；71.3±2.7)％比未負載HSP90的大鼠內(nèi)皮細胞的殺傷率(13.4±1.9；15.6±2.3)％比較明顯升高(P<0.01)；各組CTL中加入CD4+CD28-T可以明顯增強這一細胞毒性作用，各組之間負載HSP90內(nèi)皮細胞組比未負載HSP90內(nèi)皮細胞組殺傷率明顯升高(P<0.01)。③冷刺激12h后12h組和24h組的DC及HSP90負載的DC誘導的CTL對負載HSP90-EC有高度的殺傷作用，Ato能明顯抑制CT

39、L對負載HSP90-EC的殺傷作用，Ato組內(nèi)皮細胞增殖(60±10.5)％比對照組明顯升高(p<0.01)；且細胞液中LDH濃度Ato組(125±16.5)IU/L比對照組(270±14.8)IU/L明顯降低(p<0.01)。
　　 第三部分小結：
　　 (1)冷應激12h后12h組和24h組，大鼠脾臟DC功能成熟，抗原遞呈能力增強；脾臟T淋巴細胞HSP90特異性致敏，CD4+CD28-T淋巴細胞百分比顯著增加。

40、>　　 (2)體外試驗證實HSP90負載的DC能誘導CD4+CD28-T淋巴細胞增殖，而且CD4+CD28-T淋巴細胞炎性細胞因子INF-γ、IL-2、TNF-a和GZMBmRNA的表達升高，對血管內(nèi)皮細胞增殖有明顯的抑制作用，阿托伐他汀能抑制HSP90誘導CD4+CD28-T淋巴細胞增殖，能降低細胞液中INF-γ濃度。
　　 (3)冷應激12h后12h組和24h組，大鼠脾臟DC及HSP90負載的DC誘導自體的，特異性細胞毒性

41、T淋巴細胞(CTL)對負載HSP90-EC有高度的損傷作用，各組中加入CD4+CD28-T淋巴細胞對負載HSP90-EC的殺傷作用明顯增強，阿托伐他汀能明顯抑制HSP90介導的CTL對HSP90負載內(nèi)皮細胞的殺傷作用。
　　 (4)初步驗證了HSP90可以作為特異性抗原，誘導CD4+CD28-T淋巴細胞增殖，參與對負載HSP90的血管內(nèi)皮細胞的自身免疫損傷作用。
　　 (5)阿托伐他汀能干預HSP90誘導的主動脈內(nèi)皮細胞