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1、本實(shí)驗(yàn)的目的是探討奶牛卵泡發(fā)育特征,結(jié)合相應(yīng)的特征對(duì)現(xiàn)有的活體采卵(OPU)體系進(jìn)行優(yōu)化,探討高效活體采卵體外生產(chǎn)胚胎的方法和淘汰奶牛用于活體采卵的可t行性,從而發(fā)掘遺傳性能優(yōu)秀的淘汰奶牛的繁殖潛力。 試驗(yàn)的第一部分對(duì)四頭奶牛兩個(gè)發(fā)情周期每天卵巢上的卵泡發(fā)育進(jìn)行了監(jiān)測(cè),試驗(yàn)分為兩組分別由2頭經(jīng)產(chǎn)奶牛和2頭育成奶牛組成。結(jié)果表明:經(jīng)產(chǎn)母牛的發(fā)情周期明顯長(zhǎng)于育成母牛(24.5d VS 21.0d,P<0.05),經(jīng)產(chǎn)母牛(25.0d
2、,24.0d)和青年育成奶牛(21.0d,21.0d)個(gè)體間的發(fā)情周期差異不顯著;經(jīng)產(chǎn)奶牛和育成牛卵巢上的小卵泡(≤4mm)和中等卵泡(5~7mm)的數(shù)量隨時(shí)間推移不斷增加,分別平均在發(fā)情后第20天和第17天達(dá)到最多,而后急劇下降直到發(fā)情排卵.小卵泡和中卵泡的數(shù)量隨著大卵泡(≥8mm)的出現(xiàn)而減少,大卵泡的退化而增多。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)B超打印機(jī)將不同時(shí)期黃體和卵泡的影像記錄下來(lái)(參見(jiàn)圖片說(shuō)明)。 試驗(yàn)的第二部分針對(duì)6頭3~6歲只有子宮
3、繁殖障礙的淘汰奶牛進(jìn)行了活體采卵72頭次,得到5.6±2.4個(gè)卵子每頭次。試驗(yàn)還對(duì)影響活體采卵的因素進(jìn)行了研究考察。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):添加5IU/mL濃度肝素鈉的沖卵液得到的卵子回收率顯著低于10 IU/mL和15 IU/mL濃度的沖卵液(41%VS 51%,53%,P<0.05);而在后期的體外培養(yǎng)中,卵裂率和囊胚率顯著高于10 IU/mL和15 IU/mL濃度的沖卵液所獲得的卵母細(xì)胞(32% VS 10%,0%,P<0.05);60滴/
4、分鐘的流速得到的卵子回收率顯著低于其他兩個(gè)流速,而得到了卵子培養(yǎng)效果顯著高于其他兩個(gè)流速(35%vs 49%,53%,P<0.05):lOO滴/分鐘和15滴/分鐘的流速雖然得到高的回收率,但所得卵子的可用率和卵裂率都顯著低于60滴/分(33%vs 73%,84%,P<0.01);大卵泡和中卵泡的卵子回收率顯著高于小卵泡卵子的回收率(77%,64%vs 30%,P<0.01),后期培養(yǎng)的卵裂率卻顯著低于小卵泡和中卵泡的卵子(39%,73%
5、VS 81%,P<0.01);1500IU的PMSG和150IU的FSH處理可以顯著提高卵子的回收率和可用卵子數(shù);每周一次的活體采卵平均每頭次的回收數(shù)量顯著高于每周兩次(8.0±2.0 vs 5.3±3.1,P<0.05),但對(duì)后期體外培養(yǎng)的卵裂率無(wú)顯著影響(84% vs 77%,P>0.05);蔣氏雙通采卵針,COOK公司的雙通采卵針和富士平公司的單通采卵針三種不同采卵針類(lèi)型采卵得到的回收率(48%,51%VS 45%,P>0.05)
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