正畸初期矯治力對大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTA mRNA變化的影響.pdf

1、口腔正畸初期階段產(chǎn)生的疼痛一直困擾著臨床醫(yī)生和患者,探討口腔正畸疼痛的發(fā)生機(jī)制以及尋求減輕或消除疼痛的方法是目前國內(nèi)外正畸領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。P物質(zhì)(SubstanceP,SP)為頜面部公認(rèn)的主要疼痛傳導(dǎo)介質(zhì)之一[1],編碼P物質(zhì)的前體是前速激肽原A(Preprotachykinin-A,PPTA)[2]。在正畸牙齒加力過程中,已經(jīng)證實(shí)三叉神經(jīng)節(jié)中P物質(zhì)及其前體PPTAmRNA發(fā)生了明顯的變化[3][4]。但不同矯治力(正畸力)對三叉神

2、經(jīng)節(jié)中P物質(zhì)及其前體PPTAmRNA的影響還未見報(bào)道。本研究以P物質(zhì)作為疼痛介質(zhì),采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)來觀察正畸初期階段不同正畸力值作用下大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中PPTAmRNA的變化情況,從而初步探討正畸力值與正畸疼痛的關(guān)系。主要研究內(nèi)容及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、正畸大鼠動(dòng)物模型建立及實(shí)驗(yàn)分組
　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用7-9周SD

3、雄性大鼠,在其上頜一側(cè)第一磨牙和上頜同側(cè)中切牙之間放置鎳鈦螺旋拉簧加力裝置,并用自凝塑料加固連接處。SD大鼠隨機(jī)分為對照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組又根據(jù)施加的不同正畸力值分為20g組、50g組和80g組。達(dá)到規(guī)定時(shí)間后(2h、1d、3d、5d、7d),將各組大鼠處死,迅速斷頭取其三叉神經(jīng)節(jié),放入液氮中速凍保存。
　　2、大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTAmRNA的提取和PPTAmRNA引物的設(shè)計(jì)
　　本實(shí)驗(yàn)采用Trizol法成功提取了大鼠三叉神

4、經(jīng)節(jié)的總RNA,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展奠定了基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)中的引物是參考相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道設(shè)計(jì)的,設(shè)計(jì)的引物序列如下:PPTA:上游引物5′-TTCCACTCAACTGTTTGCAG-3′;下游引物5′-GTAGTTGTGCATTGCTCTTC-3′。
　　3、觀察正畸初期階段不同矯治力作用下大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTAmRNA的動(dòng)態(tài)變化
　　采用RT-PCR方法觀察到:(1)不同時(shí)間點(diǎn)對照組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTAmRNA的表達(dá)量未發(fā)現(xiàn)明顯變化

5、(p>0.05),實(shí)驗(yàn)組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTAmRNA的表達(dá)發(fā)生了明顯的變化,并呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。即加力2hPPTAmRNA的表達(dá)量開始增加;加力3d達(dá)到最高;之后逐漸下降,但7天仍然高于對照組(p<0.05)。(2)不同正畸力組之間,20g組和50g組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)PPTAmRNA的動(dòng)態(tài)變化相似,各時(shí)間點(diǎn)兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);80g組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)PPTAmRNA的表達(dá)明顯高于其它兩組(p<0.05),并且峰值有相對提前