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文檔簡介
1、口腔正畸初期階段產生的疼痛一直困擾著臨床醫(yī)生和患者,探討口腔正畸疼痛的發(fā)生機制以及尋求減輕或消除疼痛的方法是目前國內外正畸領域的研究熱點之一。P物質(SubstanceP,SP)為頜面部公認的主要疼痛傳導介質之一[1],編碼P物質的前體是前速激肽原A(Preprotachykinin-A,PPTA)[2]。在正畸牙齒加力過程中,已經證實三叉神經節(jié)中P物質及其前體PPTAmRNA發(fā)生了明顯的變化[3][4]。但不同矯治力(正畸力)對三叉神
2、經節(jié)中P物質及其前體PPTAmRNA的影響還未見報道。本研究以P物質作為疼痛介質,采用逆轉錄聚合酶鏈式反應(Reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)來觀察正畸初期階段不同正畸力值作用下大鼠三叉神經節(jié)中PPTAmRNA的變化情況,從而初步探討正畸力值與正畸疼痛的關系。主要研究內容及實驗結果如下:
1、正畸大鼠動物模型建立及實驗分組
實驗動物選用7-9周SD
3、雄性大鼠,在其上頜一側第一磨牙和上頜同側中切牙之間放置鎳鈦螺旋拉簧加力裝置,并用自凝塑料加固連接處。SD大鼠隨機分為對照組和實驗組,實驗組又根據(jù)施加的不同正畸力值分為20g組、50g組和80g組。達到規(guī)定時間后(2h、1d、3d、5d、7d),將各組大鼠處死,迅速斷頭取其三叉神經節(jié),放入液氮中速凍保存。
2、大鼠三叉神經節(jié)PPTAmRNA的提取和PPTAmRNA引物的設計
本實驗采用Trizol法成功提取了大鼠三叉神
4、經節(jié)的總RNA,為后續(xù)實驗的開展奠定了基礎。實驗中的引物是參考相關的文獻報道設計的,設計的引物序列如下:PPTA:上游引物5′-TTCCACTCAACTGTTTGCAG-3′;下游引物5′-GTAGTTGTGCATTGCTCTTC-3′。
3、觀察正畸初期階段不同矯治力作用下大鼠三叉神經節(jié)PPTAmRNA的動態(tài)變化
采用RT-PCR方法觀察到:(1)不同時間點對照組大鼠三叉神經節(jié)PPTAmRNA的表達量未發(fā)現(xiàn)明顯變化
5、(p>0.05),實驗組大鼠三叉神經節(jié)PPTAmRNA的表達發(fā)生了明顯的變化,并呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。即加力2hPPTAmRNA的表達量開始增加;加力3d達到最高;之后逐漸下降,但7天仍然高于對照組(p<0.05)。(2)不同正畸力組之間,20g組和50g組大鼠三叉神經節(jié)PPTAmRNA的動態(tài)變化相似,各時間點兩組之間無統(tǒng)計學差異(p>0.05);80g組在各個時間點PPTAmRNA的表達明顯高于其它兩組(p<0.05),并且峰值有相對提前
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