激動TRPV4受體對大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電壓依賴性鈉電流的影響.pdf

1、TRPV4是作為低滲透壓激活的滲透壓感受器被發(fā)現(xiàn)的。Phorbolester4a-phorbol12，13-didecanoate(4aPDD)是一種合成佛波脂，它是一種非蛋白磷脂酶C途徑激活通道的佛波脂類，對TRPV4有強效的特異性的激動作用。滲透壓和佛波脂兩者的通道激活機制還未曾清楚?，F(xiàn)已明確TRPV4是一種非選擇性的外向整流陽離子通道，對鈣離子和鈉離子都有通透性，鈣鈉的通透比值為5～7。TRPV4受體激動可以引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的

2、增加，對鈉離子的影響還未見相關(guān)文獻(xiàn)報道。本實驗擬用低滲和4aPDD刺激TRPV4來觀察鈉電流的變化。 (1)應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，在培養(yǎng)的大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上記錄低滲外液對細(xì)胞膜電壓依賴性鈉電流的影響。結(jié)果表明：低滲外液可濃度依賴性地抑制電壓依賴性鈉電流峰值。280mOsm，260mOsm，220mOsm分別抑制三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電壓依賴性鈉電流峰值為24.2％±10.2％(n=6，P＜0.05)和45.7％±15.6％(n=8

3、，P＜0.05)以及70.5％±18.1％(n=6，P＜0.05)，IC50為268mOsm。300mOsm，280mOsm，260mOsm，220mOsm對電壓依賴性鈉電流的翻轉(zhuǎn)電位分別為28.0mV、22.7mV、17.4mV、7.3mV(n=6，P＜0.05)。低滲外液對電壓依賴性鈉電流激活曲線無明顯影響；左移失活曲線。300mOsm、280mOsm、260mOsm、220mOsm失活曲線擬合的半數(shù)失活電壓，曲線的斜率因子分別為V

4、1/2=-45.8±9.6mV，k-17.54±6.9；V1/2=-47.2±7.8mV，k=-17.1±6.0；V1/2=-56.4±11.2mV，k=-14.4±5.8；V1/2=-60.6±10.8mV，k=-11.3±4.2(n=6，P＜0.05)。 (2)應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，在培養(yǎng)的大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元上記錄佛波脂4alphaPDD對細(xì)胞膜電壓依賴性鈉電流的影響。佛波脂4alphaPDD也可濃度依賴性地抑制大鼠三叉神

5、經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電壓依賴性鈉電流峰值。0.1，0.3，1，3，10μmol·L-14aPDD分別抑制三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元電壓依賴性鈉電流峰值24.68±7.2％(n=8，P＜0.05)，32.02±9.4％(n=7，P＜0.05)，52.7±12.2％(n=6，P＜0.05)，67.48±9.8％(n=7，P＜0.05)，73.9±14.6％(n=6，P＜0.05)，IC50為0.41μmol·L-1。0.1μmol·L-14aPDD對電壓依賴性