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文檔簡介
1、目的:檢測FNBP1在7702細胞中的表達情況和亞細胞定位;通過觀測7702細胞內源FNBP1表達沉默及恢復后的細胞效應,揭示FNBP1在細胞形態(tài)控制和生長調控過程中的作用。
方法:運用RT-PCR、western blot在mRNA水平和蛋白水平驗證FNBP1在7702細胞中的表達;運用細胞免疫熒光共定位檢驗FNBP1在7702細胞中的亞細胞定位及其與F-actin骨架的相關性;運用特異性siRNA干擾7702細胞內源FNB
2、P1的表達,于干擾初始、完全沉默和表達恢復等數個時間點觀測7702細胞在形態(tài)、活力、增殖及周期等方面的改變。
結果:FNBP1在7702細胞中穩(wěn)定表達;FNBP1定位于7702細胞皮層區(qū),與F-actin有共定位關系;FNBP1表達沉默后,7702形態(tài)發(fā)生纖維狀改變,F(xiàn)NBP1表達恢復后7702形態(tài)逆轉;FNBP1表達沉默后,7702增殖受到抑制,細胞周期在S期出現(xiàn)阻滯。
結論:細胞形態(tài)的轉變和逆轉變表明,F(xiàn)NBP1
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