Slit2-Robo1在肝細胞癌生長過程中的作用及其機制研究.pdf

1、神經(jīng)軸突的生長依賴于一系列導向系統(tǒng)的控制。近年來的研究結果表明，神經(jīng)導向分子系統(tǒng)不僅調控神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，在血管新生和腫瘤發(fā)展等方面也發(fā)揮著重要的調控作用。Slit2及其受體Robo1是神經(jīng)導向分子Slit-Robo家族中的成員。目前的研究表明Slit2和Robo1可在腫瘤血管新生、侵襲、轉移等腫瘤進程中的多個方面產(chǎn)生影響，但在其具體作用上和作用機制尚存在一定的爭議。此外，它們在肝癌進程中的作用也未見研究報道。肝癌是最常見的惡性腫瘤之一，

2、查詢資料和我們實驗檢測都表明在多數(shù)肝癌細胞中受體Robo1的表達較正常肝細胞有顯著增高，而配體Slit2在肝癌組織的表達雖然有較大的差別，但多數(shù)情況下為低調表達。這種受體和配體表達的不一致性提示在肝癌中Slit2和Robo1可能存在復雜的作用機制。為此我們設立本研究探討Slit2和Robo1在肝癌腫瘤生長過程中的作用及其機制。
　　 我們分別通過建立Robo1及其配體Slit2基因沉默和Robo1過表達的的肝癌細胞系，研究Rob

3、o1及Slit2對肝癌細胞的增殖、遷移、粘附和皮下成瘤、轉移等特性的影響，以及它們對血管新生的影響。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在高量表達Robo1的肝癌細胞系(QGY-TR50)中調低該基因表達，癌細胞的增殖力減低、粘附力增強、遷移力降低，皮下裸鼠成瘤的體積減小、重量減低、血管密度顯著降低。相反在低量表達Robo1的肝癌細胞系(SK-HEP-1)中過表達該基因，癌細胞系增殖力有升高的趨勢，細胞的粘附力降低、遷移力增高，皮下裸鼠成瘤的體積增大，重量

4、增加、血管密度顯著增高。通過鼠尾靜脈注射實驗，我們發(fā)現(xiàn)過量表達Robo1的肝癌細胞形成轉移瘤的能力明顯增強。但是，在針對Robo1的配體Slit2RNAi實驗中，我們卻發(fā)現(xiàn)低調Slit2肝癌細胞的增殖能力升高、粘附力降低、遷移力增強，體積增大，重量增加、血管密度顯著增高，鼠尾靜脈注射形成轉移瘤的能力也明顯增強。這與過表達而不是抑制其受體的影響相同。同樣，對于癌細胞黏附與轉移相關的分子表達的檢測也表明過量表達Robo1和低調Slit2表達

5、后都出現(xiàn)E-cadherin降低，N-cadherin及vimentin表達量明顯升高;而低調Robo1則結果相反。對實驗數(shù)據(jù)進行Slit2和Robo1表達間關系中我們發(fā)現(xiàn)，配體Slit2被干擾后受體Robo1的表達出現(xiàn)升高，而Robo1表達的變化對Slit2的表達則沒有發(fā)生明顯的影響。
　　 以上研究表明，Slit2和Robo1的表達變化均可在多方面影響肝癌的發(fā)展，而且受體與配體表達水平對肝癌發(fā)展影響存在明顯的非同一性;這種非