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文檔簡介
1、黃瓜(CucumissativusL.),屬葫蘆科甜瓜屬1年生攀緣草本植物,具有產(chǎn)量高、效益好等特點(diǎn),栽培面積和消費(fèi)量很大,是世界各國普遍栽培的重要蔬菜作物之一。組織培養(yǎng)是黃瓜進(jìn)行無性繁殖和種質(zhì)資源保存的有效途徑,也是進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化研究的基礎(chǔ),組織培養(yǎng)過程中產(chǎn)生體細(xì)胞無性系變異的特點(diǎn)可為黃瓜抗性育種和多倍體育種創(chuàng)造新的有價(jià)值的種質(zhì)資源。本論文以黃瓜ND420、ND105、ND226、國農(nóng)14號(hào)和國農(nóng)22號(hào)為試料,對(duì)影響黃瓜組織培養(yǎng)的諸因素
2、進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,建立了黃瓜離體子葉愈傷途徑、離體子葉節(jié)直接不定芽途徑和離體真葉胚狀體途徑再生體系,獲得再生植株,其中離體子葉節(jié)再生體系為最優(yōu)的高效再生體系,主要結(jié)果如下: 1以黃瓜子葉為材料,誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織及不定芽,建立再生體系。篩選出了適于愈傷組織及不定芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基MS+1.0mg·L-1BAP+0.05~0.1mg·L-1NAA+3.0%蔗糖+0.6%瓊脂。愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到75%以上,不定芽誘導(dǎo)率22%左右。植物
3、激素、基因型、外植體及接種方式對(duì)黃瓜子葉不定芽誘導(dǎo)有較大影響。1~3d齡子葉以近軸端垂直插入培養(yǎng)基的接種方式最有利于不定芽誘導(dǎo)。適宜濃度的硝酸銀(2~4mg·L-1)和脫落酸(0.5mg·L-1)可促進(jìn)3~5d齡子葉不定芽誘導(dǎo)。光照時(shí)間也對(duì)不定芽誘導(dǎo)有影響,光周期15h·d-1和10h·d-1及遮光時(shí)間0d和3d的不定芽誘導(dǎo)率較高。 2以黃瓜子葉節(jié)為材料,誘導(dǎo)直接不定芽,建立高頻再生體系。篩選出直接不定芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基MS+0.
4、5mg·L-1BAP+3.0%蔗糖+0.6%瓊脂,直接不定芽誘導(dǎo)率達(dá)90%~100%。外植體大小對(duì)誘導(dǎo)率影響很大,單片完整子葉大小的子葉節(jié)為最佳外植體。2.0mg·L-1硝酸銀促進(jìn)直接不定芽的誘導(dǎo)。光照時(shí)間較短的光周期處理和遮光時(shí)間較長的處理能顯著促進(jìn)黃瓜子葉節(jié)直接不定芽的伸長。 3以黃瓜真葉為材料,誘導(dǎo)胚性愈傷及胚狀體,建立再生體系。胚性愈傷誘導(dǎo)最適宜激素組合是MS+2.0mg·L-12,4-D+1.0mg·L-1BAP+0.
5、5mg·L-1NAA+6.0%蔗糖+0.6%瓊脂,胚狀體誘導(dǎo)最適宜激素組合是MS+1.0mg·L-1BAP+0.5mg·L-1NAA+6.0%蔗糖+0.6%瓊脂,胚狀體形成培養(yǎng)基是不加激素的MS+3.0%蔗糖+0.6%瓊脂,胚性愈傷和胚狀體誘導(dǎo)率達(dá)到60%左右。ND105的最適宜胚狀體誘導(dǎo)外植體為子葉,ND420和國農(nóng)14號(hào)的最適宜胚狀體誘導(dǎo)外植體為真葉。胚性愈傷誘導(dǎo)階段較高濃度(6.0%)蔗糖和適宜濃度(2.0mg·L-1)脫落酸及赤
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