蒲公英組織培養(yǎng)再生體系研究.pdf

1、本文為了滿足我國人民日常生活潛在的對蒲公英的需求，本試驗利用葉片和根，采用組織培養(yǎng)的方式，對蒲公英再生體系進行了研究，同時對花藥培養(yǎng)進行了初步探討。結果表明： 1.不同激素組合的培養(yǎng)基對葉片再生影響極顯著。葉片再生的最佳培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L NAA+1mg/L 6-BA和MS+0.2mg/L NAA+2mg/L 6-BA，其再生頻率達到100％，平均再生不定芽數(shù)達到12個/外植體(葉塊)。B5和MS培養(yǎng)基對葉片再生影響無

2、顯著差異。再生不定芽增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為’MS+0.2mg/L 6-BA和MS+0.5mg/L 6-BA。葉片再生的最短再生周期為60d。經(jīng)過增殖培養(yǎng)的再生周期需90d，其總的增值倍數(shù)可達到560倍。再生不定芽轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基生根，生根頻率可達90％以上。 2.葉片接種10d后，NAA水平(0.2～2mg/L)、NAA和BA交互作用水平對再生頻率的影響達到極顯著，BA水平(0.5～5.0mg/L)對再生頻率的影響達到顯著；20d

3、和30d后，NAA水平對再生頻率的影響達到極顯著，BA水平和NAA與BA交互作用水平不顯著。10d后，NAA水平對平均再生不定芽數(shù)的影響達到極顯著，BA水平和交互作用對平均再生不定芽數(shù)的影響不顯著。20d，30d后，NAA水平和BA水平對平均再生不定芽數(shù)的影響達到極顯著， NAA與BA交互作用水平不顯著。 3.葉片再生體系相關分析得出：NAA(0.2～2mg/L)濃度與葉片再生頻率、再生不定芽數(shù)極顯著負相關，其相關度高于BA。不

4、定芽高度與NAA濃度和BA濃度(0.5～5.0mg/L)負相關，隨著兩種激素濃度的升高，不定芽高度降低。 4.葉片再生體系回歸分析得出：再生頻率與NAA濃度的平方成負相關，與6-BA濃度的平方成負相關；同時與NAA濃度和6-BA濃度的共同作用成正相關。平均再生不定芽數(shù)與NAA濃度，BA濃度的平方成負相關；與6-BA濃度，NAA濃度的平方及兩激素濃度交互作用成正相關。 5.不同激素組合的培養(yǎng)基對根再生影響極顯著。根再生的最

5、佳培養(yǎng)基為：MS+0.2mg/L 6-BA和MS+0.5 mg/L 6-BA，其再生頻率達93％，平均再生不定芽數(shù)為5個/植體(根段)。NAA與BA的組合使用時，根再生頻率和平均再生不定芽數(shù)顯著低于只使用BA的再生頻率和平均再生不定芽數(shù)。再生不定芽轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基生根，生根頻率可達90％以上。試驗發(fā)現(xiàn)無菌根接種在含有6-BA的MS培養(yǎng)基中，先形成球狀體結構，再形成不定芽，當培養(yǎng)基中有生長素NAA，沒有形成球狀體結構。通過石蠟切片觀察發(fā)現(xiàn)，

6、球狀體結構的形成與根形成不定芽有一定的關系。 6.不同濃度的BA對根再生影響極顯著。50d 1 mg/L BA的再生頻率顯著低于0.2mg/L 和0.5 mg/L BA的再生頻率。0mg/L 和1.0mg/L的。BA對應的平均再生不定芽數(shù)極顯著低于0.2mg/L 和0.5mg/L的BA對應的平均再生不定芽數(shù)。培養(yǎng)基中同時使用NAA和BA，NAA水平、BA水平和交互作用水平，再生頻率和平均再生不定芽數(shù)均達到顯著。 7.根再

7、生體系相關分析得出：NAA濃度(0.2～2mg/L)與無菌根再生頻率和平均再生不定芽數(shù)成顯著負相關，BA濃度(0.5～5.0mg/L)與無菌根再生頻率和平均再生不定芽數(shù)成負相關但沒有達到顯著水平。隨著兩種激素濃度的升高無菌根再生頻率和平均再生不定芽數(shù)降低。 8.根再生體系回歸分析得出：平均再生不定芽數(shù)與NAA濃度，BA濃度的平方成負相關，與BA濃度，NAA濃度的平方及兩激素濃度交互作用成正相關。 9.根段在未加任何激素的