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文檔簡介
1、本研究以紅花羊蹄甲(Bauhinia blakeana)當(dāng)年生幼嫩帶芽莖段、葉片和葉柄為試驗(yàn)材料,通過正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)合方差分析,探討了紅花羊蹄甲離體培養(yǎng)的關(guān)鍵影響因素,存在問題及解決方法,對紅花羊蹄甲無菌苗誘導(dǎo)、莖段和葉片、葉柄愈傷組織誘導(dǎo)及分化、壯苗生根、煉苗與移栽等方面進(jìn)行了研究,以得到最佳培養(yǎng)配方及培養(yǎng)程序,從而為建立紅花羊蹄甲的快繁體系、工廠化生產(chǎn)提供理論與技術(shù)依據(jù)。
通過組織培養(yǎng)技術(shù)研究得出:
①紅
2、花羊蹄甲外植體組織培養(yǎng)最佳取材時間為3月,啟動率高,污染率相對其它時期較低,莖段、葉片和葉柄的啟動率分別為91.6%、81.8%和89.5%,污染率分別為21.6%、19.3%和19.6%。
②用0.1%的升汞滅菌,莖段的最佳滅菌時間為8min,葉片為4min,葉柄為6min。
③初代培養(yǎng):莖段培養(yǎng)以MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1+IBA0.5mg·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方,啟動
3、率高達(dá)91.4%,愈傷組織誘導(dǎo)率81.2%,出芽指數(shù)1.8;葉片愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)以MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+2,4-D0.1mg·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方,愈傷組織誘導(dǎo)率為75.6%;葉柄愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)以MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+2,4-D0.05mg·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方,愈傷組織誘導(dǎo)率為71.8%。
④繼代培養(yǎng):適宜于芽繼代增殖培養(yǎng)的最優(yōu)組合是M
4、S+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+1BA0.5mg·L-1,增殖倍數(shù)達(dá)3.7,有效苗數(shù)2.7;適宜于莖段愈傷組織繼代增殖培養(yǎng)的最優(yōu)組合是MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1,增殖倍數(shù)達(dá)4.4;適宜于莖段愈傷組織分化培養(yǎng)的最優(yōu)組合是MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1,分化率達(dá)85.9%。
⑤有效苗的培養(yǎng):以MS培養(yǎng)基為最適宜培
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