龍腦樟組織培養(yǎng)再生體系研究.pdf

1、樟樹（Cirmamonun Camphora(L.) presl）中含有的龍腦，具有重要的藥用價(jià)值，被認(rèn)為是我國(guó)冰片生產(chǎn)的最佳原料。龍腦樟有植物黃金的美譽(yù)，既是高級(jí)香料，又是名貴稀有藥材，同時(shí)也是化工原料。本試驗(yàn)以優(yōu)良龍腦樟扦插苗為基本研究材料，通過(guò)無(wú)性系繁殖獲得植株，在組織培養(yǎng)過(guò)程中，開展了對(duì)龍腦樟不同外植體滅菌方式、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗和移栽等多個(gè)試驗(yàn)，建立龍腦樟無(wú)性繁殖體系。為龍腦樟工廠化育苗奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)的研究結(jié)

2、果如下：
　　1．龍腦樟無(wú)菌體系的建立。頂芽莖段使用：75％乙醇8s+0.1%HgCl28min+2滴吐溫效果最好；莖段中部使用：75%乙醇10s+0.1%HgCl210min+2滴吐溫效果最好；莖段基部：75%乙醇20s+0.1%HgCl215min+2滴吐溫效果最好，可使外植體污染率降到最低，成活率最高。
　　2．龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，外植體誘導(dǎo)愈傷組織難易排序：莖段＞葉柄＞嫩葉，選擇莖段為愈傷組織外植體。愈

3、傷組織誘導(dǎo)率最高的培養(yǎng)基配方為：MS+2,4-D3.0mg/L+NAA0.4 mg/L+IBA0.4 mg/L；通過(guò)極差分析結(jié)果和方差分析，各因素對(duì)龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)影響作用的順序?yàn)椋?,4-D＞IBA＞NAA，2,4-D對(duì)龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)影響最大。
　　3．龍腦樟不定芽誘導(dǎo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，頂芽莖段的萌芽率明顯高于帶腋芽莖段。龍腦樟不定芽芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為：MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20g/L，

4、通過(guò)極差分析結(jié)果和方差分析，各因素對(duì)龍腦樟不定芽誘導(dǎo)影響作用的順序?yàn)椋?-BA＞NAA＞蔗糖，6-BA各種濃度對(duì)不定芽誘導(dǎo)影響顯著。
　　4．抑制褐化。試驗(yàn)通過(guò)三種方式抑制褐化，試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)使用 AC對(duì)外植體褐化抑制效果最佳，AC濃度在1.0g/L時(shí)抑制龍腦樟外植體褐化能力最強(qiáng)。
　　5．龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)不定芽。愈傷組織繼代增殖系數(shù)最高的培養(yǎng)基配方為：MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.6mg/L+蔗糖20g/

5、L，通過(guò)極差分析結(jié)果和方差分析，各因素對(duì)龍腦樟不定芽誘導(dǎo)影響作用的順序?yàn)椋?-BA＞NAA＞蔗糖。
　　6．龍腦樟繼代增殖培養(yǎng)。極差分析中的R值得出，各因素對(duì)不定芽增殖培養(yǎng)影響作用的順序?yàn)椋?-BA＞NAA＞IBA。不定芽增殖系數(shù)最高的培養(yǎng)基配方為：MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.25mg/L。
　　7．繼代次數(shù)對(duì)龍腦樟苗繼代的影響。進(jìn)行多次繼代培養(yǎng)試驗(yàn)，研究多次繼代對(duì)龍腦樟增殖系數(shù)的影響。隨著繼代次數(shù)增加，龍腦樟