丹參多酚酸鹽對(duì)兔肢體缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立兔肢體缺血再灌注損傷模型，觀察丹參多酚酸鹽對(duì)模型肢體缺血再灌注過(guò)程中血清炎性介質(zhì)白細(xì)胞介素-8（IL-8）、血栓素B2(TXB2)、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量以及丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影響;觀察丹參多酚酸鹽對(duì)模型肢體肌肉組織干濕重比值的影響;病理學(xué)分析丹參多酚酸鹽對(duì)模型肌肉組織肌纖維破壞的干預(yù)程度;從大體病理、細(xì)胞、分子等不同水平的系統(tǒng)探討，丹參多酚酸鹽對(duì)肢體缺血再灌注損傷的干預(yù)作用及其作用機(jī)

2、理。
　　 方法:健康新西蘭兔30只，隨機(jī)數(shù)字法分為3組（n=10/組），分別為假手術(shù)組:僅游離出右后肢股動(dòng)脈不進(jìn)行缺血損傷，術(shù)后6h測(cè)量右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)，6h后再次測(cè)量右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)并采集標(biāo)本;模型組:手術(shù)游離出右后肢小腿股動(dòng)脈，用微血管夾阻斷股動(dòng)脈，在阻斷處以下用橡皮帶彈性環(huán)結(jié)扎，阻斷側(cè)支循環(huán)造成兔右后肢缺血模型，術(shù)后6h測(cè)量右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)，恢復(fù)血流造成缺血再灌注模型，于再灌注6h后再次測(cè)量右后肢小腿中

3、段水平周長(zhǎng)，并采集標(biāo)本;治療組:造模方法同模型組，術(shù)后6h測(cè)右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)并恢復(fù)血流，在恢復(fù)血流前1h靜脈注射丹參多酚酸鹽（50mg/kg），再灌注6h后再次測(cè)量右小腿中段水平周長(zhǎng)并采集標(biāo)本。計(jì)算各組模型右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)減少百分比[(術(shù)后6h-術(shù)后12h)/術(shù)后6h×100％];切取各組動(dòng)物右后肢小腿中段脛前肌及腓腸肌進(jìn)行干濕重比值的檢查;下腔靜脈穿刺取-3-5ml，血液凝固后以2000r/min離心取血清，用雙抗體兩步夾

4、心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清TNF-α、IL-8含量;放射免疫分析法測(cè)定血清中血栓素(TXB2)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;所有脛前肌標(biāo)本制成普通病理切片（HE染色），光學(xué)顯微鏡下觀察肌纖維組織的破壞程度，并進(jìn)行圖文分析。
　　 結(jié)果:組織形態(tài)學(xué)觀察:模型組可見(jiàn)骨骼肌橫紋紊亂，嚴(yán)重肌纖維變形斷裂，間質(zhì)水腫明顯，大量急性炎性細(xì)胞浸潤(rùn);治療組炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減輕，肌纖維斷裂明顯減少，骨骼肌水腫，間質(zhì)細(xì)

5、胞、炎細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，血腫吸收、機(jī)化較快，與模型組比較提前進(jìn)入恢復(fù)期。右后肢小腿中段水平周長(zhǎng)比較:術(shù)后12h與術(shù)后6h減少百分比分別為2.91±0.77，3.37土0.18，3.99±0.76(％)，模型組較假手術(shù)組大，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療組經(jīng)丹參多酚酸鹽處理后高于假手術(shù)組及模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。血清各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果:模型組血清SOD含量為(81.08±5.92)u/ml，較正常組低，差異有顯著性意

6、義（P＜0.01），治療組SOD含量較模型組高，差異有顯著性意義（P＜0.05）。模型組血清TNF-α含量為(120.55±17.17)pg/ml，與假手術(shù)組比較差異具有顯著性意義，治療組在同一時(shí)間點(diǎn)TNF-α含量較模型組低，差異具有顯著性意義(P＜0.05)。模型組血清MDA含量高于假手術(shù)組，差異有顯著性意義，治療組MDA含量高于假手術(shù)組但低于模型組，介于兩者之間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，P＜0.01)。治療組血清炎性介質(zhì)TX

7、B2及IL-8含量均顯著低于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與假手術(shù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。骨骼肌干濕重比值:治療組骨骼肌干濕重比值較模型組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，與假手術(shù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示丹參多酚酸鹽對(duì)模型肢體缺血再灌注有較顯著的保護(hù)作用，該作用機(jī)制可能與抑制炎性因子激活釋放、促進(jìn)纖溶系統(tǒng)激活有關(guān)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示丹參多酚酸鹽還能有效改善內(nèi)皮細(xì)胞功能，減少氧自由基的產(chǎn)