孵化期雞胚胎死亡及其遺傳影響因素的研究.pdf

1、為了研究整個孵化期的雞胚胎死亡規(guī)律、雌性和雄性胚胎死亡規(guī)律，以及種蛋品質和胚胎發(fā)育相關基因的變異對胚胎死亡、雌性和雄性胚胎死亡的影響，本試驗以溫氏集團培育的黃雞種蛋為研究對象，探討了種蛋品質與種蛋受精、胚胎成活和性別的相關性；對與人和小鼠胚胎發(fā)育相關的維甲酸X受體Q亞型（RXRa）和胰島素樣生長因子2受體（IGF2R）兩個基因進行了SNP位點的篩選和多態(tài)性檢測；探討了胚胎發(fā)育相關基因SNP多態(tài)性及其與胚胎死亡、死亡胚胎性別、種蛋品質的相

2、關性；同時探討和初步建立用于早期胚胎性別鑒定的分子生物學方法。主要研究結果如下： 1．初步建立了用雙重PCR技術鑒定雞早期胚胎性別的分子生物學方法，可用于鑒定胚盤和發(fā)育早期胚胎的性別。 2．探討了胚胎死亡規(guī)律。整個孵化期胚胎死亡高峰期主要集中在2-6天和17-19天。雄性胚胎在兩個高峰期的死亡數高于雌性胚胎。 3．尋找和檢測了基因SNP。在雞RXRα基因的4個外顯子和2個內含子中發(fā)現了18個SNP位點，對7個SN

3、P位點進行了PCR-RFLP檢測。IGF2R基因第34外顯子發(fā)現2個SNP位點，對1個SNP位點進行了PCR-RFLP檢測。 4．分析了胚胎RXRα僅和IGF2R的SNP位點PCR-RFLPs基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中分布特征。經卡方檢驗，雞RXRα基因第2外顯子HhaⅠ-RFLP基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中差異極顯著；IGF2R基因第34外顯子AlwNⅠ-RFLP基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中存在顯著差異。 5．分析了

4、胚胎RXRα和IGF2R的SNP位點PCR-RFLPs基因型在雌性和雄性胚胎中分布特征。經卡方檢驗，雞RXRa基因第15內含子HhaⅠ-RFLP基因型在雌性和雄性胚胎中差異顯著，在死亡雌性胚胎和死亡雄性胚胎中差異極顯著。 6．RXRα基因第2外顯子BstXⅠ-RFLP基因型GG的胚胎的種蛋蛋殼厚度極顯著地高于基因型AA、AG的蛋殼厚度；死亡胚胎中，基因型GG的種蛋蛋殼厚度顯著地高于基因型AA、AG的蛋殼厚度。在第15內含子Hha