氧化應(yīng)激和金屬基質(zhì)蛋白酶在NAFLD大鼠的表達及普羅布考的治療作用研究.pdf

1、目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)已成為全球最常見的肝病之一，且發(fā)病率逐年上升。從單純性脂肪肝到脂肪性肝炎發(fā)病的病理生理機制尚未完全明確。然而由活性氧引起的氧化應(yīng)激被認(rèn)為是NAFLD進展的重要因素。本實驗擬通過高脂飲食誘導(dǎo)大鼠NAFLD模型，觀察NAFLD大鼠機體氧化應(yīng)激狀態(tài)、金屬基質(zhì)蛋白酶的表達，研究普羅布考對NAFLD大鼠的治療作用，并探討金屬基質(zhì)蛋白酶在NAFLD大

2、鼠中的作用，及可能的病理生理機制。
　　 方法:健康雄性SD大鼠40只，隨機分成兩組:正常飲食組(normaldietgroup，NG)16只，予普通飼料喂養(yǎng);高脂飲食組(high-fatdietgroup，HG)24只，予高脂飼料喂養(yǎng)。8周末兩組各隨機選擇8只大鼠，分別命名為8周正常對照組(NG8W)和8周高脂模型組(HG8W)，并處死鑒定成模。第9W開始將高脂飲食組隨機分為2組:14周高脂組模型組(HG14W)和普羅布考治療

3、組(PB組)，各8只，繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料。PB組給予普羅布考灌胃，NG14W和HG14W予等體積的0.5％羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，6周后處死所有大鼠，測定各組大鼠體重、肝指數(shù)、甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素6(IL-6);檢測各組肝組織丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等脂質(zhì)過氧化標(biāo)志物及抗氧化物質(zhì)水平;免

4、疫組化觀察各組肝組織MMP-2、MMP-9表達情況。常規(guī)制備HE染色，光鏡觀察肝臟病理學(xué)改變。
　　 結(jié)果:(1)與同期正常對照組相比，HG8W和HG14W大鼠體重、肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α、IL-6水平及肝MDA均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均p＜0.01），GSH-Px、SOD明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均p＜0.01）。光鏡下，HG8W大鼠肝臟出現(xiàn)空泡樣脂肪變性，伴炎癥細(xì)胞浸潤，HG14W肝細(xì)胞重

5、度脂肪變，伴大量炎性細(xì)胞浸潤及膠原纖維，并出現(xiàn)粗大的纖維間隔。(2)PB組大鼠的肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α、IL-6水平及肝勻漿MDA均低于HG14W組，差異有統(tǒng)計學(xué)差異(均p＜0.01)，GSH-Px、SOD明顯升高，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（均p＜0.01），光鏡下觀察PB組大鼠肝組織小葉結(jié)構(gòu)存在，邊界尚清，其脂肪變程度及炎性細(xì)胞浸潤程度均較HG14W好轉(zhuǎn)。(3)MMP-2、MMP-9免疫組織化學(xué)顯示:光鏡下觀察，N

6、G大鼠肝組織未見明顯MMP-2、MMP-9抗體陽性細(xì)胞;HG8W、HG14W大鼠肝臟則有較強的MMP-2、MMP-9表達，表現(xiàn)為胞漿和細(xì)胞膜染色呈棕黃色、棕褐色，陽性顆粒粗細(xì)不等，著色明顯，免疫組化評分與NG大鼠相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均p＜0.01）;PB組大鼠的肝臟MMP-2、MMP-9表達較HG14W弱，表現(xiàn)為陽性顆粒的著色程度及陽性細(xì)胞數(shù)均較少，但較NG14W表達仍高，比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（均p＜0.01）。
　　 結(jié)論: