CCK對慢性砷中毒大鼠初級感覺傳入影響的實驗研究.pdf

1、目的：復(fù)制慢性砷中毒大鼠模型,研究CCK對慢性砷中毒大鼠初級感覺傳入的影響作用,初步探討其作用機制,為臨床慢性砷中毒的機制研究提供實驗依據(jù),并尋求治療慢性砷中毒的有效藥物。 方法： 1、創(chuàng)建胎鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的培養(yǎng)方法,并進行神經(jīng)元特異性的染色鑒定。 2、復(fù)制慢性砷中毒模型,行為學(xué)檢測模型復(fù)制成功后讓其受孕,培養(yǎng)孕16-18 d的胎鼠的DRG神經(jīng)元,培養(yǎng)前用CCK進行預(yù)處理,觀察CCK對培養(yǎng)DRG神經(jīng)元生長時間

2、的影響。 3、免疫組織化學(xué)檢測CCK在砷中毒大鼠背根神經(jīng)節(jié)的表達,并檢測CCK陽性表達光密度半定量均值。 4、電生理學(xué)技術(shù)測定不同程度砷中毒大鼠坐骨神經(jīng)復(fù)合動作電位和傳導(dǎo)速度,給予CCK孵育后觀察CCK對砷中毒大鼠坐骨神經(jīng)復(fù)合動作電位和傳導(dǎo)速度的影響。 結(jié)果： 1、培養(yǎng)出了DRG神經(jīng)元細(xì)胞,神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)染色鑒定細(xì)胞陽性。 2、CCK預(yù)處理后,LD組DRG神經(jīng)元細(xì)胞的存活時間平均從

3、原來的154±3 h延長到186±4h,MD組DRG神經(jīng)元細(xì)胞的存活時間平均從原來的79±4 h延長到114±2 h。CCK對HD組神經(jīng)元細(xì)胞存活時間的影響無顯著性差異。 3、CCK在慢性砷中毒大鼠背根神經(jīng)節(jié)上的表達與正常對照組相比有所增強。NC組、LD組、MD組和HD組測得CCK表達陽性細(xì)胞的半定量光密度均值分別是0.163±0.002、0.196±0.003、0.274±0.011、0.201±0.004,以MD組反應(yīng)陽性細(xì)

4、胞的半定量光密度均值最高。 4、和對照組相比,隨著砷中毒程度的增加,三個實驗組動作電位的幅值及傳導(dǎo)速度呈下降趨勢。LD組和MD組應(yīng)用CCK以后,動作電位的幅值及傳導(dǎo)速度有所恢復(fù),但HD組在應(yīng)用CCK后,動作電位的幅值及傳導(dǎo)速度幾乎沒有影響。 結(jié)論： 1、慢性砷中毒胎鼠DRG神經(jīng)元與對照組DRG神經(jīng)元相比存活時間有所縮短。 2、CCK可使慢性輕、中度砷中毒胎鼠的DRG神經(jīng)元的存活時間延長,對神經(jīng)元起到一定的