柴胡質(zhì)量評價方法及藥效學(xué)比較研究.pdf

1、柴胡為常用中藥材，具有解表和里、舒肝解郁、升提中氣等功效，中國藥典收載北柴胡（Bupleurum chinense DC.）和狹葉柴胡（B.scorzonerifolium Willd.）的干燥根。柴胡主要藥效成分為柴胡皂苷和揮發(fā)油，其中柴胡皂苷類成分的含量較高，且以柴胡皂苷a、d的藥理作用最強(qiáng)。目前藥典中規(guī)定的柴胡藥材并無含量測定項(xiàng)，僅限于定性鑒別，不能有效控制其質(zhì)量。為此，本論文通過比較研究，旨在建立柴胡皂苷a、d的含量測定方法，結(jié)

2、合指紋圖譜技術(shù)對柴胡的質(zhì)量控制進(jìn)行系統(tǒng)研究，以建立完善、可控的柴胡藥材質(zhì)量評價方法，同時比較了藥典正品北柴胡和紅柴胡藥效作用間的差異性。
　　建立了HPLC柱前酸化處理測定柴胡皂苷a、d含量的方法，以單因素結(jié)合正交試驗(yàn)優(yōu)化酸處理?xiàng)l件為:藥材提取液加入8％鹽酸于30℃恒溫反應(yīng)18h，用8％KOH調(diào)節(jié)pH值至中性。色譜條件為:Hypersil ODS-C18柱(200mm×4.6mm，5μm)，檢測波長250nm，流動相乙腈-0.05

3、％H3PO4(38∶62)，流速，1.0mL·min-1，柴胡皂苷a線性范圍0.119～2.38μg(r=0.9998)，平均回收率99.96％(RSD=1.67％)，柴胡皂苷d線性范圍0.157～3.14μg(r=0.9994)，平均回收率98.73％(RSD=1.28％);分析測定不同產(chǎn)地、不同品種、不同生長方式的118份柴胡藥材樣本。
　　建立了基于HPLC-UV的柴胡指紋圖譜分析方法，因改進(jìn)了流動相酸的種類，解決了一直困擾

4、因紫外末端吸收波長檢測帶來的色譜圖基線波動不平的問題，獲得了理想的HPLC圖譜，色譜條件為:色譜柱Diamonsil（鉆石）C18(200mm×4.6mm，5μm)，檢測波長203nm，以乙腈-水（均含0.02％ CF3COOH）為流動相，梯度洗脫，流速1.0mL·min-1。測定不同品種、不同產(chǎn)地的36個柴胡樣品，得32個共有峰，并采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件”、“SPSS軟件”和“SIMCA-P軟件”對指紋圖譜進(jìn)行分析。

5、r>　　比較研究北柴胡和紅柴胡在解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛及保肝等方面藥效作用間的差異，分別采用大鼠2，4—二硝基苯酚致熱實(shí)驗(yàn)、小鼠光熱法致尾痛實(shí)驗(yàn)、小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)及四氯化碳所致小鼠急性肝損傷實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　研究結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的柴胡藥材其柴胡皂苷a、d含量差異明顯，建議柴胡種植時應(yīng)做產(chǎn)地適應(yīng)性考察;柴胡藥材栽培品的質(zhì)量均一性較好，可替代野生品;化學(xué)成分分析，北柴胡與近緣種正品紅柴胡有較近的親緣關(guān)系而與非藥典正品黑柴胡的親