自體骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死的實驗研究.pdf

1、背景：急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后心肌細胞丟失和心室重構(gòu)是導致心力衰竭進展和臨床死亡的主要原因。近年來因治療方法的改進(包括介入、手術(shù)及藥物治療)能有效的對梗死相關(guān)動脈再灌注，但因為心肌梗死通常在梗塞動脈開通之前已迅速發(fā)生。所以此類治療并不能使已梗死的心肌功能得到改善。干細胞技術(shù)的發(fā)展，為治療急性心肌梗死帶來希望并成為現(xiàn)今研究的熱點。骨髓干細胞是研究最廣泛的成體干細胞種類，它是存在骨髓

2、腔的一組具有多向分化潛能的干細胞，具有分化成為心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞等潛能。骨髓干細胞具有易于獲得，低毒性或無毒性，一次移植長期有效，自體移植無免疫排斥反應等優(yōu)點。另外骨髓干細胞可取自患者自身，不存在倫理道德上的爭議。這些特性使骨髓干細胞成為再生醫(yī)學研究中一種非常重要的細胞來源。 目的：探討兔自體骨髓干細胞(骨髓單個核細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞)移植方法對急性心肌梗死(AMI)的治療效果和骨髓間充質(zhì)干細胞在心肌梗死區(qū)存活

3、的情況。 方法：用結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立兔急性心肌梗死模型。無菌條件下骨穿抽取兔股骨骨髓，在體外進行骨髓單個核細胞的分離、骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、純化和培養(yǎng)。將24只成年日本大白兔隨機分為對照組(組Ⅰ，n=8)、骨髓間充質(zhì)干細胞組(組Ⅱ，n=8)、骨髓單個核細胞組(組Ⅲ，n=8)。在組Ⅰ的心肌疤痕區(qū)注入無血清的細胞培養(yǎng)基。在組Ⅱ的心肌疤痕區(qū)注射5-溴脫氧尿嘧啶(5-Brdu)標記的自體骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)，組Ⅲ則注射自

4、體骨髓單個核細胞(n=8)，移植4周后用超聲心動圖觀察組間心功能及病理變化的差異，并用免疫組化的方法檢測干細胞的分化程度。 結(jié)果：自體骨髓單個核細胞(MBMCs)和骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)移植4周后，MSCs組超聲檢查左室功能重建指標如左室射血分數(shù)(EF)較梗死對照組改善明顯(66.08±5.70 vs．48.87±8.42 P<0.05)、左室短軸縮短率(FS)較梗死對照組改善明顯(33.86±2.58 vs．24.73±

5、5.05 P<0.05)：MBMCs組EF較梗死對照組改善明顯(65.38±4.84 vs．48.87±8.42 P<0.05)、FS較梗死對照組(35.48±2.86 vs．24.73±5.05)改善明顯(P<0.05)；MBMCs組和MSC組EF和FS比較，無明顯差異(P>0.05)。MSCs組移植4周后，兔心肌梗死區(qū)有移植細胞存活、增殖，并分化為有心肌細胞特征的細胞。 結(jié)論：本實驗提示自體骨髓干細胞(骨髓單個核細胞和骨髓間