磁標記自體骨髓干細胞移植治療急性心肌梗死的磁共振示蹤研究.pdf

1、目的：應用超順磁性氧化鐵顆粒標記小型家豬骨髓干細胞，自體移植治療急性心肌梗死，應用磁共振進行活體成像，探討磁共振成像示蹤磁探針標記細胞的可行性。 方法：分離培養(yǎng)小型家豬自體骨髓干細胞，采用超順磁氧化鐵顆粒對骨髓干細胞進行標記，普魯士藍染色顯示細胞內鐵，臺盼藍拒染法評估細胞活力，磁共振進行標記細胞的成像。將25只用于心肌梗死模型制備的豬分為實驗組19只和對照組6只。選擇經皮行左或右頸動脈或股動脈穿刺途徑，以1.5～2.0mm球囊封

2、堵左前降支下1／3，持續(xù)封堵60min后，由豬體表心電圖證實心肌梗死模型成功后，撤出球囊，結扎頸動脈或股動脈。經皮冠脈內骨髓干細胞輸注,麻醉急性心肌梗死模型豬，梗死模型建立24h后，經皮股動脈穿刺行冠脈造影，應用OTW導管冠脈內輸注骨髓干細胞細胞懸液，然后將盛放細胞的注射器及OTW導管以肝素生理鹽水沖洗注入殘余細胞，對照組經同樣方法注入未標記細胞。術后磁共振活體示蹤骨髓干細胞，并測量對應序列移植標記細胞后局部信號減低區(qū)域心肌的信噪比及移

3、植前對應部位心肌的信噪比(SNR)，與心肌組織切片普魯士藍染色、免疫組織化學染色對照。 結果： 1、骨髓干細胞的超順磁氧化鐵顆粒標記率在9996以上，在含超順磁氧化鐵顆粒的培養(yǎng)基中骨髓干細胞可繼續(xù)增殖，細胞活力無明顯變化。標記細胞群成像，較未標記細胞均有信號降低改變，以T<,2><'*> WI序列的信號強度變化率最大。由于細胞分裂時的稀釋作用，細胞內的對比劑會逐漸減少。 2、實驗組15只和對照組4只小型家豬進入結

4、果分析，兩組各2只死于心肌梗死模型制備，實驗組2只死于磁共振檢查前麻醉意外。19只心肌梗死模型中，13只標記細胞移植后T<,2><'*> WI序列心肌梗死周邊見低信號區(qū)，移植后第4周信號改變明顯減弱，8周后低回聲信號均消失，離體T<,2><'*> WI序列示梗死區(qū)周邊一個呈點狀分布的低信號區(qū)。注入標記細胞實驗組在注射前及注射后1周、2周、3周、4周，注射前對應部位及局部低信號區(qū)的SNR分別為12.03±0.45，6.75±0.26，7.

5、82±0.43。9.28±0.29，11.50±0.30。與注射前比較，實驗組注射細胞后1周、2周、3周SNR差異具有統(tǒng)計學意義(p值均<0.05)，信號明顯下降，4周時SNR雖仍較低，但差異已無統(tǒng)計學意義。對照組未標記細胞移植后與移植前比較，SNR改變差異均無統(tǒng)計學意義。 3、組織學檢查發(fā)現(xiàn)13只(細胞數10<'6>以上)普魯士藍細胞陽性，對應部位結蛋白染色陽性、重鏈肌球蛋白染色弱陽性，分布部位與磁共振信號減低區(qū)一致。