不同給藥頻度PTHrP1-34骨同化作用功效的實驗觀察.pdf

1、目的：骨質(zhì)疏松癥(osteoporosisOP)是一種以低骨量和骨組織微結(jié)構(gòu)破壞為特征，導(dǎo)致骨骼脆性增加和易發(fā)生骨折的全身代謝性骨病。一旦發(fā)生非創(chuàng)傷性骨折，嚴(yán)重影響著老年人的生活質(zhì)量。甲狀旁腺激素相關(guān)肽(parathyroidhormonerelatedpeptidePTHrP)是作為惡性腫瘤高鈣血癥的致病因子而被人們發(fā)現(xiàn)的，因其氨基端肽的結(jié)構(gòu)與作用同PTH相似而得名。研究發(fā)現(xiàn)，小劑量的PTHrP具有很好的骨同化作用，可以潛在用來治療骨

2、質(zhì)疏松癥。該實驗室已完成的另一項研究發(fā)現(xiàn)，每公斤體重40μgPTHrP1-34對去卵巢大鼠具有顯著的骨質(zhì)疏松防治功效。該研究的主要目的是觀察不同頻度給藥的PTHrP1-34對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的骨同化作用效果，找出PTHrP的最佳給藥方式，為更好的發(fā)揮PTHrP治療骨質(zhì)疏松的作用提供幫助，為骨質(zhì)疏松的治療找到更好的藥物。 方法：4月齡雌性未孕Wistar大鼠70只，隨機分組，每組10只。假手術(shù)組(Sham組)、去卵巢組(OVX組

3、)、苯甲酸雌二醇組(E組)、每日一次組(P1D組)、兩日一次組(P2D組)、三日一次組(P3D組)、每周一次組(P1W組)。去卵巢4周后，治療組按設(shè)定頻度給予40ug/kgPTHrP1-34皮下注射，E組給予苯甲酸雌二醇40ug/kg三日一次皮下注射，Sham組及OVX組給予0.2ml的生理鹽水皮下注射，每日一次。給藥12周后，心臟取血處死，留取血清，測定血清中的E2、Ca、P、ALP、IL-6、TNF-α、IGF-Ⅰ、BGP水平。留取

4、腰椎，測定3-6腰椎骨密度，同時1、3、5用于做腰椎壓縮試驗，取右側(cè)股骨用于測量骨密度及做三點彎曲試驗并測定灰重/干重比。取右側(cè)脛骨用于做骨組織形態(tài)計量學(xué)實驗。 結(jié)果： 1.骨密度的變化：OVX組股骨、L3、L4、L5、L6及L3-6腰椎骨密度低于Sham組，有顯著性差異(P＜0.05)，說明本實驗骨質(zhì)疏松大鼠模型造模成功。E組、P1D組、P2D組同OVX組相比較，所觀察各部位骨密度有顯著性升高(P＜0.05)，同Sha

5、m組相比無顯著性差異。 2.骨礦鹽(灰重/干重比)的變化：OVX組股骨灰重/干重比低于Sham組，有顯著性差異(P＜0.05)，E組、P1D組、P2D組灰重/干重高于OVX組，有顯著性的差異(P＜0.05)，同Sham組相比無顯著性的差異。 3.骨生物力學(xué)性能的改變：股骨三點彎曲試驗中，OVX組最大載荷及彈性模量同Sham組相比顯著降低(P＜0.05)；E組、P1D組、P2D組最大載荷及彈性模量顯著高于OVX組(P＜0.

6、05)，同Sham組相比無顯著性差異。腰椎壓縮試驗中，OVX組L1、L3、L5最大載荷及彈性模量明顯低于Sham組(P＜0.05)，而E組、P1D組、P2D組最大載荷及彈性模量明顯高于OVX組(P＜0.05)。 4.骨組織形態(tài)計量學(xué)參數(shù)的比較：OVX組骨小梁面積百分比顯著性的低于Sham組，E組、P1D組、P2D組、P3D組骨小梁面積百分比高于OVX組(P＜0.05)，有顯著性的差異。P1D組、P2D組礦化沉積率顯著性的高于OV

7、X組(P＜0.05)。 5.血清中Ca、P、ALP、BGP水平的比較：各組血清中Ca、P水平無顯著性差異，說明該實驗PTHrP1-34所用劑量不會導(dǎo)致高血鈣、低血磷的發(fā)生；OVX組血清ALP活性、BGP水平明顯高于Sham組，說明去卵巢后骨代謝水平增高；P1D、P2D組血清BGP水平顯著高于OVX組。 6.血循環(huán)中細胞因子IL-6、TNF-α、IGF-Ⅰ水平的變化：OVX組血清IL-6、TNF-α水平顯著高于Sham組，

8、說明去卵巢后調(diào)節(jié)破骨活性的細胞因子表達增多。OVX組血清IGF-Ⅰ水平顯著低于Sham組，而P1D、P2D組血清IGF-Ⅰ水平顯著高于OVX組。 結(jié)論： 1.4月齡Wistar大鼠可用來成功制造去卵巢骨質(zhì)疏松動物模型，去卵巢后大鼠骨量減少、骨力學(xué)強度降低、骨組織形態(tài)結(jié)構(gòu)明顯異常。 2.PTHrP1-34可以提高去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠股骨和腰椎的骨密度及灰重/干重比，每日一次及隔日一次的給藥頻率都可以有效地提高骨密度及

9、骨礦鹽含量。 3.PTHrP1-34可以提高去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠骨強度及骨質(zhì)量，每日一次及隔日一次的給藥方式都可以有效地提高骨強度及骨質(zhì)量。 4.PTHrP1-34可以提高骨小梁面積，促進骨礦沉積，改善去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的骨組織結(jié)構(gòu)。 5.PTHrP1-34對血清中的Ca、P、ALP水平?jīng)]有明顯的影響。PTHrP對血清中IL-6、TNF-α的影響不明確，PTHrP可以提高血清中的IGF-Ⅰ、BGP的水平。