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文檔簡介
1、目的:觀察病毒性心肌炎(Vital Myocarditis,VMC)小鼠心肌骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)的表達(dá)情況,探討OPN在病毒性心肌炎中表達(dá)的意義。
方法:以柯薩奇病毒B3(Coxsackie virus B3,CVB3)感染BALB/C小鼠(n=32)建立病毒性心肌炎動物模型,同時設(shè)正常組(n=32),取心肌組織病理切片行HE染色及Masson染色,并計算病理積分及心肌膠原纖維容積分?jǐn)?shù)(CVF)、RT
2、-PCR及ELJSA法檢測OPN表達(dá)、RT-PCR檢測Ⅰ型膠原(ColⅠ)含量并做相關(guān)性分析。
結(jié)果:⑴柯薩奇病毒B3可成功建立BALB/C小鼠病毒性心肌炎動物模型。⑵心肌組織病理學(xué)改變:VMC早期心肌細(xì)胞壞死,炎癥反應(yīng)明顯,恢復(fù)期炎癥細(xì)胞逐漸消失,膠原明顯增生。⑶心肌組織病理積分:病毒組各時間點(diǎn)心肌病理積分明顯高于對照組(P<0.05),以第7天增高最為明顯,第14天后逐漸下降,第28天增高幅度最低。⑷RT-PCR檢測心
3、肌組織OPN mRNA表達(dá):對照組及病毒組小鼠心肌中均有OPN mRNA表達(dá),病毒組小鼠心肌組織中OPN mRNA表達(dá)量于第7天最高,第14天后表達(dá)開始下降,第28天時表達(dá)量較低,但均高于對照組小鼠心肌組織中的含量(P<0.05)。⑸Elisa法檢測心肌組織OPN表達(dá):病毒組小鼠OPN濃度于第7天最高,第14天后逐漸下降,第28天降至最低,但均高于對照組(P>0.05)。⑹心肌纖維容積分?jǐn)?shù)(CVF)結(jié)果顯示:病毒組第7天~第14天CVF
4、與對照組相比無明顯差異(P>0.05);病毒組第21天、第28天CVF與對照組、病毒組第7天、第14天組比較有明顯差異(P<0.05)。⑺RT-PCR檢測心肌組織Ⅰ型膠原mRNA(ColⅠ mRNA)表達(dá):病毒組第7天、第14天心肌ColⅠ表達(dá)較弱,與同期對照組相比無明顯差異(P>0.05),第14天后開始增強(qiáng),第28天最高,第21天、第28天ColⅠ mRNA/GAPDH光密度值與對照組、第7天、第14天比較有明顯差異(P<0.05)
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