蘭科重要藥用植物DNA條形碼鑒定及其生態(tài)適宜性.pdf

1、IlJlrlllll]JJlr[1llllJIrllllJIrllllllllrlllY3292913⑧氅卷隰攢博I二學(xué)位論文荊警鰳暈簿羼鰳∞黔掣嘲’‘‘’，，i‘≯。，’、。__lt一：：墼邃殛越鲺蔥媾寓性，1。i湯歡q。硝2016年12月訾‰B墊12董Q￡蘭科重要藥用植物DNA條形碼鑒定及其生態(tài)適宜性摘要蘭科植物是被子植物中最進(jìn)化的類群和世界性大科之一，在全世界約有800屬20000。35000種。蘭科植物中可供藥用的物種較多。由于

2、生態(tài)環(huán)境遭破壞、過(guò)度采挖、科研滯后等因素，導(dǎo)致許多野生蘭科藥用植物的生境遭到破壞甚至喪失，野生蘭科藥用植物資源量急劇減少。蘭科藥用植物中的許多物種因其形態(tài)高度進(jìn)化，物種之間僅有細(xì)微差異，從形態(tài)上對(duì)其進(jìn)行鑒定較困難，急需尋求一種更高效的適宜用于鑒定蘭科藥用植物的方法。此研究運(yùn)用DNA條形碼分子鑒定法對(duì)蘭科藥用植物進(jìn)行鑒定研究，探討此分子鑒定法在鑒定蘭科藥用植物上的可行性，期望DNA條形碼分子鑒定法能從分子水平支持蘭科藥用植物的傳統(tǒng)形態(tài)分類

3、，推動(dòng)蘭科藥用植物鑒定研究。蘭科藥用植物是近年來(lái)開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)，重要問(wèn)題之一就是生態(tài)適宜性問(wèn)題，人們常常因所選擇的引種地不適宜而使種植出的藥材達(dá)不到藥典規(guī)定的藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。鑒于這一現(xiàn)實(shí)問(wèn)題，此研究期望尋求一種簡(jiǎn)便方法解決該問(wèn)題，為蘭科藥用植物的引種提供科學(xué)支撐。此研究運(yùn)用DNA條形碼分子鑒定法對(duì)163份蘭科藥用植物樣品進(jìn)行DNA條形碼分子鑒定研究，并運(yùn)用為研究藥用植物產(chǎn)地生態(tài)適宜性而開(kāi)發(fā)的“藥用植物全球產(chǎn)地生態(tài)適宜性區(qū)劃信息系統(tǒng)”(GMPG

4、IS)對(duì)其中較常用及珍稀瀕危的19種蘭科重要藥用植物進(jìn)行生態(tài)適宜性研究，并對(duì)在野外調(diào)查、鑒定及生態(tài)適宜性研究中發(fā)現(xiàn)的一種蘭科齒唇蘭屬新種開(kāi)展相關(guān)研究。1蘭科藥用植物DNA條形碼分子鑒定研究蘭科藥用植物形態(tài)分類困難，此研究運(yùn)用DNA條形碼分子鑒定方法從分子水平驗(yàn)證蘭科藥用植物的傳統(tǒng)形態(tài)分類。以marKpsbA—trnH和ITS2序列作為DNA條形碼對(duì)已進(jìn)行過(guò)形態(tài)鑒定的49屬135種163份蘭科藥用植物樣品進(jìn)行分子鑒定。經(jīng)DNA提取，PCR

5、擴(kuò)增、雙向測(cè)序及校對(duì)拼接后，將得到的序列在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行BLAST比對(duì)，然后運(yùn)用MEGA70軟件中的NeighborjoiningmJ)法構(gòu)建物種系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果表明：163份蘭科重要藥用植物樣品均能成功提取DNA；matKpsbAtrnH和ITS2序列的PCR擴(kuò)增效率分別為100％，100％干B9877％；此研究中共得到487條蘭科藥用植物DNA條形碼序列，其中的345條序列在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中比對(duì)到了相應(yīng)物種的序列，