復(fù)方布洛芬片有關(guān)物質(zhì)及鉤藤化學成分制備研究.pdf

1、復(fù)方布洛芬片是由布洛芬和對乙酰氨基酚組成的復(fù)方制劑，用于軟組織損傷引起的疼痛，骨關(guān)節(jié)炎，肩周炎，類風濕性關(guān)節(jié)炎等。目前關(guān)于布洛芬和對乙酰氨基酚合用制劑的有關(guān)物質(zhì)測定方法的文獻未見報道，為保證藥品質(zhì)量的穩(wěn)定可控，本課題采用高效液相色譜法檢測復(fù)方布洛芬片中有關(guān)物質(zhì)。
　　鉤藤[Uncaria rhynchophylla(Miq.)Jacks]為茜草科(Rubiaeeae)鉤藤屬(Uncaria)植物。主要分布于廣東、廣西、湖南等南方各

2、省。幾十年來隨著提取分離手段的不斷進步，有關(guān)鉤藤的化學成分研究取得了較大的成果。從鉤藤中分離出的化學成分有吲哚生物堿類、三萜類、黃酮類、香豆素類、喹喏酸皂苷類、酚類及有機酸等，其中吲哚生物堿類有105個。本課題對鉤藤所含的化學成分進行系統(tǒng)分離，得到5個化合物，并利用LC-MS和薄層色譜法對各單體化合物進行純度檢測和定性鑒別。
　　本研究是按以下步驟完成的，內(nèi)容結(jié)果如下：
　　一、廣泛查閱國內(nèi)外相關(guān)研究資料結(jié)合布洛芬、對乙酰氨

3、基酚兩主成份及其相關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，對磷酸水-乙腈、磷酸鹽-甲醇、醋酸銨-甲醇和甲醇-水等多種流動相系統(tǒng)進行色譜分離條件的選擇研究，確定采用pH＞5.3弱酸性的磷酸鹽緩沖液水相和甲醇-乙腈混合有機相系統(tǒng)，進行復(fù)方布洛芬片有關(guān)物質(zhì)的測定方法研究。通過對色譜柱、流動相組成、梯度、波長和pH值等條件優(yōu)化，得到復(fù)方布洛芬片HPLC法有關(guān)物質(zhì)測定的最佳條件：C18柱（ODS）（4.6×150mm，5μm），柱溫35℃，檢測波長225nm、245

4、nm；流動相：以甲醇-乙腈(10:90)混合溶液為溶液A，磷酸鹽緩沖液（pH5.80±0.10）-溶液A(95:5)為溶液B，洗脫梯度見表3。
　　二、對建立復(fù)方布洛芬片有關(guān)物質(zhì)測定的HPLC法進行耐用性、專屬性、精密度、穩(wěn)定性及定量限等方法學驗證。耐用性試驗考察色譜儀器、色譜柱、流動相組成、柱溫、流速、pH等內(nèi)容；對復(fù)方布洛芬片進行了強酸、強堿、氧化、高溫、濕、光照等破壞性試驗，以驗證該方法的專屬性。對氨基苯酚、對氯苯乙酰胺和4

5、-異丁基苯乙酮采用外標法進行定量，經(jīng)精密度、穩(wěn)定性、定量限和檢測限、線性與范圍、回收率試驗等方法學考察，其它單一雜質(zhì)和總雜質(zhì)采用主成份對照法定量。
　　三、對復(fù)方布洛芬片進行了強酸、強堿、氧化、高溫、濕、光照等破壞性試驗，并對各雜質(zhì)進行來源歸屬分析，探討相關(guān)物質(zhì)產(chǎn)生的條件和途徑。結(jié)果表明：復(fù)方布洛芬片在酸性、堿性和氧化條件下，主成分容易降解產(chǎn)生新的雜質(zhì)，這些新雜質(zhì)主要由對乙酰氨基酚產(chǎn)生，其中來源于對乙酰氨基酚的對氨基酚雜質(zhì)可在酸性

6、和堿性破壞條件下產(chǎn)生。在高溫、光照和濕的環(huán)境中，復(fù)方布洛芬片性質(zhì)較為穩(wěn)定，主要產(chǎn)生布洛芬的雜質(zhì)，光照條件下會產(chǎn)生4-異丁基苯乙酮。故提示藥品貯存應(yīng)注意避光，干燥密封，避免與酸、堿、氧化性物質(zhì)接觸。
　　四、進行了鉤藤化合物單體制備研究。鉤藤鉤莖5kg，用15倍量70％甲醇、0.1％HCl回流提取3次，每次3h，濾過，合并三次提取液，減壓回收溶劑，得到鉤藤的甲醇浸膏。浸膏加適量水混勻后，用濃氨水調(diào)pH至9-10，依次用二氯甲烷、正丁