傳染性支氣管炎弱毒苗黏膜免疫途徑對雛雞氣管及哈德氏腺SIgA細(xì)胞分布的影響.pdf

1、本研究采用改良硫酸銨鹽析法、Macro—prep High Q陰離子交換柱層析純化得到雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)，免疫家兔制備兔抗雞SIgA多克隆抗體。將傳染性支氣管炎弱毒苗對1日齡雛雞分別進(jìn)行點(diǎn)眼免疫A組和C組，滴鼻免疫B組和D組，并且在11日齡時(shí)加強(qiáng)免疫C組和D組，以葡萄球菌A蛋白—辣根過氧化酶(SPA—HRP)間接組化染色，對哈德氏腺和氣管中SlgA細(xì)胞的分布、數(shù)量變化及消長規(guī)律進(jìn)行研究，以期了解黏膜免疫應(yīng)答的機(jī)理，為禽病的

2、防控提供理論依據(jù)。結(jié)果表明：分離純化得到的雞SIgA濃度達(dá)22mg／mI；經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS—PAGE)可知，雞SIgA重鏈分子質(zhì)量為64-65ku，輕鏈為26～28ku，J鏈約16ku；用純化的雞sIgA免疫兔得到1：128兔抗雞SlgA抗血清。染色結(jié)果顯示：SIgA陽性細(xì)胞呈圓形或卵圓形，也有少量梭形、柱狀或不規(guī)則形狀。SIgA細(xì)胞分布于哈德氏腺的間質(zhì)中，且主要分布在各級管腔上皮及腺上皮周圍，其中成熟的漿細(xì)胞緊貼腺

3、上皮及管腔上皮分布。氣管中slgA細(xì)胞主要分布在氣管黏膜上皮之間和固有膜處，局部黏膜上皮形成小隱窩，隱窩內(nèi)和隱窩下的固有膜中有較多的SIgA型漿細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)分析表明：相同日齡各免疫組哈德氏腺和氣管中SIgA陽性細(xì)胞數(shù)都顯著高于對照組(p<0.01)，點(diǎn)眼A組顯著高于滴鼻免疫B組，C組又顯著高于D組(P<0.01)；二次免疫C組比單次免疫A組和D組比B組產(chǎn)生更多SlgA陽性細(xì)胞；C組和D組雛雞25日齡時(shí)SlgA細(xì)胞達(dá)峰值，而A組和B組在35