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1、傳染性支氣管炎病毒(infections bronchitis virus，IBV)是當(dāng)前影響我國及世界養(yǎng)禽業(yè)的主要病原之一。除Beaudette株外，其他毒株難以在體外細胞系中傳代培養(yǎng)，嚴(yán)重限制了該病毒感染與致病機制研究及新型疫苗的研發(fā)。為研究傳染性支氣管炎病毒(IBV)除Beaudett株外均難以在體外傳代培養(yǎng)的影響因素，本研究首先應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測IBV經(jīng)典毒株M41囊膜與宿主細胞膜融合程度，發(fā)現(xiàn)M41可以在體外培養(yǎng)條件下侵入雞的
2、細胞系LMH和DF1，但熒光定量PCR檢測顯示侵入的M41無法增殖。通過對比分析已發(fā)表的M41易感組織氣管、非易感組織脾臟及LMH細胞全基因組轉(zhuǎn)錄譜數(shù)據(jù)，本研究發(fā)現(xiàn)宿主細胞粘附、細胞周期、p53及SRC可能是M41在體外培養(yǎng)細胞中增殖的宿主決定因素。本研究通過在2D培養(yǎng)體系中預(yù)先孵育Gelatin和3D培養(yǎng)兩種方式來調(diào)節(jié)細胞粘附的物理環(huán)境，發(fā)現(xiàn)兩種方法均可以促進M41在體外培養(yǎng)細胞中的增殖;利用多種經(jīng)典細胞周期抑制劑及p53和SRC活性
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