雞傳染性支氣管炎活疫苗耐熱劑型的初步研究.pdf

1、雞傳染性支氣管炎是由雞傳染性支氣管炎病毒引起的高度接觸性急性呼吸道傳染病。雛雞感染會(huì)導(dǎo)致發(fā)育遲緩，甚至死亡。成年雞感染一般不會(huì)死亡，但會(huì)引起母雞產(chǎn)蛋量下降，雞蛋的質(zhì)量下降，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。疫苗免疫是防控雞傳染性支氣管炎的關(guān)鍵。傳染性支氣管炎活疫苗耐熱性差，目前市場(chǎng)上的雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗主要在-15～-20℃下保存，在運(yùn)輸過程中必須依靠“冷鏈”系統(tǒng)，成本高且不便于偏遠(yuǎn)地區(qū)的運(yùn)輸、使用。本試驗(yàn)通過配制的耐熱保護(hù)劑與病毒液

2、混合，并經(jīng)過真空冷凍干燥技術(shù)和真空泡沫干燥技術(shù)制備出能夠耐高溫的雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗。通過耐熱保護(hù)劑的篩選、干燥工藝的優(yōu)化、樣品殘余水分的測(cè)定、37℃10天耐老化試驗(yàn)以及保存期試驗(yàn)等篩選出能夠耐受高溫的雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗。以期解決雞傳染性支氣管炎活疫苗室溫保存不穩(wěn)定的難題，為活疫苗室溫保存的研究奠定基礎(chǔ)。
　　1、雞傳染性支氣管炎活疫苗真空冷凍干燥劑型的研究
　　為了提高雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗的耐熱性能，首

3、先進(jìn)行冷凍干燥耐熱保護(hù)劑的篩選，配方中的主要成分有蔗糖、明膠、EDTA等，通過單因素變量試驗(yàn)，以制備出的疫苗的外觀形態(tài)、干燥疫苗殘余水分含量以及37℃耐老化試驗(yàn)篩選出合格的耐熱保護(hù)劑配方。配方確定后又對(duì)真空冷凍干燥工藝進(jìn)行調(diào)整，以期制備出圓餅狀、表面平整無萎縮、底部無分層的雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗，雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗的殘水含量在2～3％之間，37℃10d耐老化試驗(yàn)病毒滴度損失在1.0Lg以內(nèi)。本次試驗(yàn)篩選出S3-T4、S3-T

4、9耐熱保護(hù)劑配方，37℃耐老化試驗(yàn)病毒滴度損失分別為0.74Lg、0.67Lg。
　　2雞傳染性支氣管炎活疫苗泡沫干燥劑型的研究
　　泡沫干燥保護(hù)劑的主要成分有海藻糖、明膠、EDTA等，通過單因素變量試驗(yàn)對(duì)耐熱保護(hù)劑的各個(gè)成分及比例進(jìn)行篩選，以比獲得能夠增強(qiáng)雞傳染性支氣管炎病毒活疫苗穩(wěn)定性的耐熱配方。以制備出的疫苗的外觀形態(tài)、干燥疫苗殘余水分含量以及37℃耐老化試驗(yàn)篩選出合格的耐熱保護(hù)劑配方，再通過保存期試驗(yàn)篩選出最優(yōu)的耐熱

5、保護(hù)劑配方?；趪?guó)內(nèi)外文獻(xiàn)及試驗(yàn)室已有的泡沫干燥程序進(jìn)行調(diào)整，篩選出適合雞傳染性支氣管炎病毒的干燥程序，以期最終制備的疫苗泡沫高度在1/2～3/4之間、泡沫均勻、殘余水分含量不超過4％、在室溫能夠較長(zhǎng)時(shí)間保存。本次試驗(yàn)篩選出P3、P3-11、P3-13、P3-15這4個(gè)比較穩(wěn)定的耐熱保護(hù)劑配方，對(duì)疫苗的殘余水分測(cè)定結(jié)果為2.5％、2.6％、2.8％、2.2％，室溫保存4個(gè)月后病毒滴度分別損失了0.79Lg、0.85Lg、0.89Lg、0