實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎集合淋巴結(jié)及其淋巴細(xì)胞增殖與凋亡的研究.pdf

1、目的:本研究采用回腸末端-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)建立實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎動(dòng)物模型,觀察發(fā)病過程中回腸末端集合淋巴結(jié)(PP結(jié))及其淋巴細(xì)胞增殖和凋亡的情況;探討PP結(jié)及其淋巴細(xì)胞在發(fā)病過程中的作用,完善末端回腸炎的發(fā)病機(jī)制,為末端回腸炎的臨床診治及科研提供一定的指導(dǎo)作用。
　　方法:選用清潔級(jí)SD大鼠,隨機(jī)分為造模組、縫線組、對(duì)照組,每組30只,分別予以回腸末端-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)、回腸末端縫手術(shù)線、僅麻醉不手術(shù)的處理。術(shù)后2、4、8周分批處死大鼠

2、,取末端回腸組織,分別觀察其病理學(xué)改變,及PP結(jié)及其淋巴細(xì)胞增殖和凋亡的情況并分析。
　　結(jié)果:
　　1.末端回腸組織病理學(xué)改變:造模組術(shù)后2周為急性炎癥的表現(xiàn),炎癥僅限于粘膜層,粘膜以中性粒細(xì)胞浸潤為主,術(shù)后4周炎癥漸加深,炎癥細(xì)胞由中性粒細(xì)胞漸轉(zhuǎn)為淋巴細(xì)胞浸潤為主,充血出血的急性炎癥表現(xiàn)漸減輕,而病變侵及粘膜下層同時(shí)伴有少量成纖維細(xì)胞增生,至第8周時(shí)為典型的慢性炎癥的表現(xiàn),粘膜以淋巴細(xì)胞浸潤為主。
　　2.PP結(jié)及

3、其淋巴細(xì)胞增殖和凋亡的情況
　　2.1PP結(jié)數(shù)量與集合淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞總數(shù)的變化:與對(duì)照組相比,縫線組在第2周和第4周時(shí),PP結(jié)個(gè)數(shù)有少量增加(P2周>0.05、P4周<0.05),第8周時(shí),PP結(jié)個(gè)數(shù)與對(duì)照組相似(P8周>0.05)。而造模組在第2周和第4周時(shí),PP結(jié)個(gè)數(shù)顯著增加(P2周<0.05、P4周<0.01),第8周時(shí),PP結(jié)個(gè)數(shù)少量增加(P8周>0.05)。PP結(jié)淋巴細(xì)胞總數(shù)的變化情況與PP結(jié)個(gè)數(shù)相似。
　　2.2

4、PP結(jié)淋巴細(xì)胞凋亡率和增殖率的變化:與對(duì)照組相比,縫線組和造模組在第2周和第4周時(shí),PP結(jié)淋巴細(xì)胞少量細(xì)胞凋亡,兩者相比無差異性(P2周、4周>0.05),第8周時(shí),縫線組和造模組PP結(jié)淋巴細(xì)胞均發(fā)生大量細(xì)胞凋亡(P8周<0.01),兩者相比具有顯著性差異(P<0.01)。PP結(jié)淋巴細(xì)胞數(shù)的增殖情況與PP結(jié)淋巴細(xì)胞總數(shù)增加情況相似。
　　2.3凋亡DNA梯度條帶的變化:對(duì)照組2、4、8周,縫線組2、4周以及造模組2、4周大鼠回腸P

5、P結(jié)淋巴細(xì)胞小分子DNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果中未見200bp小分子DNA條帶,而縫線組8周,造模組8周大鼠回腸PP結(jié)淋巴細(xì)胞小分子DNA表現(xiàn)為典型的“梯形”(200bp、400bp)條帶,但造模組200bp條帶較縫線組為明顯,表明造模組的細(xì)胞凋亡更為顯著。
　　2.4PP結(jié)淋巴細(xì)胞凋亡核染色(hoechst33258)的變化:與對(duì)照組相比,縫線組和造模組在第2周和第4周時(shí),PP結(jié)淋巴細(xì)胞染核細(xì)胞數(shù)明顯增加,兩者相比具有顯著性差異(P

6、<0.05),與PP結(jié)淋巴細(xì)胞總數(shù)增加情況相似。第8周時(shí),縫線組和造模組PP結(jié)淋巴細(xì)胞均發(fā)生大量細(xì)胞凋亡,與對(duì)照組相比具有顯著性差異(P<0.05)。而且造模組出現(xiàn)明顯的凋亡核形態(tài),核呈固縮狀態(tài),可見新月狀核。
　　結(jié)論:
　　1.在實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎造模2-8周內(nèi),末端回腸粘膜炎癥急性期以中性粒細(xì)胞浸潤為主,慢性期以淋巴細(xì)胞浸潤為主。
　　2.在實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎造模2-8周內(nèi),PP結(jié)及其淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)先增殖為主、后凋亡為