酮替芬對鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠胰島功能的影響.pdf

1、目的:隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和生活水平的提高，糖尿病的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)正呈上升趨勢，而我國大中城市糖尿病患病率亦不斷上升。近年來，一些二線城市的糖尿病發(fā)病率也不斷增加。其中90％以上為2型糖尿病(T2DM)。而長期高糖高脂飲食引起的胰島素抵抗(IR)正是2型糖尿病的發(fā)病關(guān)鍵所在。本研究以高糖高脂飼料喂養(yǎng)聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)的方式，誘導產(chǎn)生2型糖尿病模型大鼠。予酮替芬灌胃處理，研究酮替芬對鏈脲佐菌素誘導的糖尿病模型大鼠胰島功能的

2、影響及其可能作用機制。
　　 方法:
　　 1.雄性SD大鼠，6-8周，體重160-180g，飼養(yǎng)于溫州醫(yī)學院實驗動物中心SPF級環(huán)境中。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分為正常飼料組16只和高糖高脂飼料組(HF組)20只。
　　 2.正常組給予基礎(chǔ)飼料喂食，HF組大鼠予高糖高脂飼料喂養(yǎng)。8周后HF組予腹腔注射STZ,空腹血糖值＞13 mmol/L，則認為T2DM大鼠模型建立成功。共計16只造模成功。
　　 3.成

3、功建立的模型組，再隨機分為糖尿病對照組(DM組)和酮替芬治療糖尿病組(KTDM組)。正常飼料組隨機分為空白對照組(NC組)和酮替芬藥物組(Ketotifen Treatment，KT組)。酮替芬每日用量為0.09mg/kg，空白對照組、糖尿病對照組大鼠用生理鹽水代替灌胃。持續(xù)8周后全部處死。
　　 4.宰殺后留取血液標本，測定空腹血糖(FBG)，空腹胰島素(FINS)，計算胰島素敏感指數(shù)和胰島素抵抗指數(shù);用ELISA法檢測血清中

4、炎癥因子白介素-6(IL-6)，腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平。取胰腺組織，測定琥珀酸脫氫酶(SDH)和細胞色素氧化酶(CCO)活性，同時制片在光鏡和電鏡下觀察胰島的形態(tài)變化。
　　 5.正態(tài)分布的實驗結(jié)果數(shù)據(jù)用(x)±s表示，用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析，多組間差異的顯著性用單因素方差分析，組間比較采Student-Newman-Keuls檢驗進行統(tǒng)計處理。（設(shè)α=0.05。）
　　 6.結(jié)果:
　　

5、1.酮替芬對糖尿病大鼠空腹血糖和胰島素水平的影響:與NC組和KT組比較，DM組大鼠空腹血糖、胰島素水平顯著升高，ISI明顯下降而HOMA-IR顯著升高。酮替芬治療8周的KTDM組大鼠血糖、胰島素水平下降，ISI回升、HOMA-IR明顯下降，與DM組大鼠比較差別具有統(tǒng)計學意義，但仍高于NC組和KT組，說明酮替芬治療能改善糖尿病大鼠的糖代謝狀態(tài)和高胰島素血癥，改善胰島素抵抗，但尚未能恢復正常水平。而NC組和KT組血糖與胰島素水平比較差別不具

6、有統(tǒng)計學意義，說明酮替芬對正常血糖和胰島素分泌無影響。
　　 2.酮替芬對糖尿病大鼠細胞色素C氧化酶及琥珀酸脫氫酶活性的影響:與NC組和KT組比較，DM組大鼠CCO與SDH活性明顯降低，表明糖尿病大鼠胰腺線粒體功能障礙，處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。給予酮替芬治療8周后，上述指標明顯回升，提示酮替芬改善胰腺線粒體功能障礙，從而使線粒體功能得到某種程度改善。但與正常組相比較，仍有明顯差異。而NC組和KT組SDH和CCO活性比較差別不具有統(tǒng)計學

7、意義，說明酮替芬對正常大鼠線粒體功能無明顯影響。
　　 3.酮替芬對糖尿病大鼠血清IL-6、TNF-α水平的影響:與NC組和KT組比較，DM大鼠血清IL-6、TNF-α水平均明顯升高，提示處于炎癥狀態(tài)。酮替芬治療后，血清IL-6、TNF-α水平降低有明顯統(tǒng)計學差異，但與正常對照組比較仍偏高，表明酮替芬能一定程度上改善糖尿病的炎癥狀態(tài)。NC組與KT組無明顯統(tǒng)計學差異。
　　 4.光鏡下觀察:NC組及KT組胰島細胞表現(xiàn)正常。

8、DM組多數(shù)胰島細胞退行性及壞死性改變，胰島不規(guī)則，結(jié)構(gòu)紊亂，KTDM組經(jīng)治療8周后結(jié)構(gòu)恢復良好。
　　 5.透射電鏡下觀察:NC組及KT組β細胞內(nèi)分泌顆粒豐富，細胞核較大，呈卵圓形，核膜光滑。DM組表現(xiàn)分泌顆粒明顯減少，致密芯密度減低，線粒體腫脹，細胞核變形、核膜不光滑，可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。8周后KTDM組明顯改善，分泌顆粒增多，致密芯密度逐漸恢復。
　　 結(jié)論:酮替芬的干預(yù)使糖尿病大鼠血糖下降，血IL-6、TNF-α水平明