寧夏枸杞道地性原因及其耐鹽性特征研究.pdf

1、枸杞子(Gouqizi，F(xiàn)ructusLycii)是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，迄今已有2000年以上的應(yīng)用史?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》(1985-2005年版)規(guī)定，枸杞子為茄科植物寧夏枸杞(LyciumbarbarumL.)的干燥成熟果實(shí)，具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目等功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)枸杞子具有增強(qiáng)免疫、抗衰老、抗腫瘤、抗氧化等藥理作用。寧夏作為我國(guó)枸杞子的道地產(chǎn)區(qū)，其盛產(chǎn)的枸杞子因品質(zhì)上乘而馳名中外，傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)認(rèn)為寧夏

2、枸杞最為道地，然而其道地性的原因研究很少。本試驗(yàn)采用不同生態(tài)區(qū)田間采樣與分析測(cè)試相結(jié)合的方法，應(yīng)用DNA指紋圖譜和高效液相色譜指紋圖譜技術(shù)，同時(shí)結(jié)合環(huán)境因子分析對(duì)寧夏枸杞道地性的原因進(jìn)行了系統(tǒng)研究，在盆栽條件下對(duì)寧夏枸杞的耐鹽性特征進(jìn)行了探討。主要研究結(jié)果如下： 1、寧夏枸杞道地性的形成是遺傳種質(zhì)(基因型)和環(huán)境因素長(zhǎng)期相互作用的結(jié)果，與其他野生中藥材不同，寧夏枸杞經(jīng)過長(zhǎng)期的人工栽培和無性繁殖，優(yōu)良品種在目前生產(chǎn)中占主導(dǎo)地位；基

3、因組DNA分析表明，各地主要栽培品種在遺傳上是同源的。寧夏枸杞主要有效成分枸杞多糖、甜菜堿、β-胡蘿卜素和黃酮等物質(zhì)在不同地區(qū)具有顯著的差異，有效成分的差異是中藥材道地性存在的主要標(biāo)志，說明環(huán)境因素是寧夏枸杞道地性形成的主要原因。 2、通過對(duì)兩種DNA提取方法比較研究，認(rèn)為CTAB法較為適合寧夏枸杞葉片基因組DNA的提??；通過對(duì)模板DNA，Primer和Mg2+濃度的優(yōu)化試驗(yàn)及PCR反應(yīng)程序的篩選，確定了適合枸杞的RAPD反應(yīng)體

4、系和反應(yīng)程序，從而建立了寧夏枸杞的RAPD分析技術(shù)體系。選用OPERON公司的96個(gè)隨機(jī)引物，運(yùn)用優(yōu)化的RAPD分析體系對(duì)全部樣品進(jìn)行了RAPD擴(kuò)增，其中30個(gè)隨機(jī)引物能對(duì)全部樣品進(jìn)行有效擴(kuò)增，譜帶清晰且多態(tài)性較好，依據(jù)擴(kuò)增結(jié)果構(gòu)建了寧夏枸杞主栽品種寧杞1號(hào)DNA指紋圖譜。 3、高效液相色譜方法測(cè)定了不同地區(qū)種植的寧夏枸杞中主要成分(β-胡蘿卜素、甜菜堿、黃酮等)含量，方法簡(jiǎn)單，分析時(shí)間短，準(zhǔn)確度高。建立了寧夏枸杞特征成分β-胡

5、蘿卜素提取液高效液相色譜(HPLC)圖譜并進(jìn)行了聚類分析，為寧夏枸杞化學(xué)指紋圖譜構(gòu)建奠定了基礎(chǔ)。 4、通過對(duì)全國(guó)主要枸杞產(chǎn)區(qū)(寧夏，內(nèi)蒙，新疆和河北)枸杞品質(zhì)性狀和特征成分與相應(yīng)的土壤和氣象因子進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)環(huán)境因素中土壤因子起主導(dǎo)作用，其中土壤含鹽量與枸杞多糖和甜菜堿顯著正相關(guān)，是影響寧夏枸杞道地性的重要因素；土壤肥力水平和光照條件是影響枸杞產(chǎn)量和商品品質(zhì)的主要因素。 5、盆栽條件下，一定濃度的土壤鹽分(小于0.6