去甲二氫愈創(chuàng)木酸對小鼠胚泡植入的影響.pdf

1、目的:①研究去甲二氫愈創(chuàng)木酸(nordihydroguaiaretic acid，NDGA)對小鼠胚胎早期發(fā)育的影響；②用NDGA處理植入前期小鼠后觀察子宮內(nèi)膜光鏡和超微結構變化；③研究NDGA處理植入前期小鼠后子宮內(nèi)膜基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9，MMP-9)與基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1(tissue inhibitor 0fmetalloprotdnaso-1,TLMP-1)表達的變化。

2、 方法:以成年未經(jīng)產(chǎn)雌性昆明種小鼠為研究對象，雌雄鼠3:1合籠，第二天清晨查到陰栓記作孕1d，將120只孕2d小鼠隨機分4組(低劑量、中劑量、高劑量和對照組)，每組30只，低劑量、中劑量、高劑量組分別按10 mg/kg，30 mg/kg，90mg/kg劑量皮下注射NDGA，對照組注射等量PBS溶液；孕4d，每組各取15只孕鼠，頸椎脫臼處死，取出子宮，刮取約lmm3子宮內(nèi)膜組織，戊二醛固定，透射電鏡分析子宮內(nèi)膜結構的變化，余下子宮

3、組織4％多聚甲醛固定，HE染色、免疫組化SP法檢測MMP-9、TIMP-1表達，顯微成像系統(tǒng)拍攝圖像，進行計算機圖像分析；孕8d，處死另半數(shù)孕鼠檢測子宮臟器系數(shù)和胚胎著床數(shù)。 　　結果:①NDGA對小鼠子宮臟器系數(shù)、植入胚胎數(shù)的影響：對照組小鼠子宮臟器系數(shù)(2.387±0.376)％，植入胚胎數(shù)15.87±1.92，低劑量組小鼠子宮臟器系數(shù)(2.3414-0.106)％，植入胚胎數(shù)14.93±1.79，與對照組相比無顯著差異(

4、P>0.05)；中劑量組小鼠子宮臟器系數(shù)(1.350±0.010)％，植入胚胎數(shù)8.27±0.96，與對照組相比，有不同程度的減少(P<0.05)，高劑量組小鼠子宮臟器系數(shù)(0.850±0.287)％，與對照組相比，顯著下降(P<0.01)，未見胚胎植入。②NDGA對小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)學的影響：光鏡觀察結果顯示，對照組與低劑量組小鼠子宮內(nèi)膜發(fā)育明顯，基質(zhì)疏松、基質(zhì)細胞肥大，腺上皮細胞與腔上皮細胞柱狀。中劑量組與高劑量組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)結構

5、較為緊密、基質(zhì)細胞變小，子宮內(nèi)膜腺上皮細胞與腔上皮細胞變矮。透射電鏡結果表明，對照組與低劑量組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞胞膜完整，胞質(zhì)內(nèi)富含粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體，腺上皮與腔上皮富含線粒體，表面可見短小微絨毛；中劑量組與高劑量組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞邊界不清，腺上皮細胞與腔上皮細胞線粒體空泡變性。③)NDGA對小鼠子宮內(nèi)膜MMP-9與TIMP-1表達的影響：免疫組織化學SP法染色結果顯示，MMP-9與TIMP-l在對照組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞、腺上皮

6、細胞與腔上皮細胞中均有陽性表達；與對照組相比，低劑量組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞、腺上皮與腔上皮細胞MMP-9與TIMP-1免疫陽性細胞的平均光密度值(mean optical density,MOD)差異無顯著性(P>0.05)，中劑量組與高劑量組小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞、腺上皮與腔上皮細胞MMP-9與TIMP-1免疫陽性細胞的MOD值與對照組相比，差異具有顯著性(P<0.05)。 結論:①NDGA可能具有抑制小鼠胚胎植入的作用且此作