羊副結(jié)核病ELISA檢測方法的研究.pdf

1、副結(jié)核病(paratuberculosis)是由副結(jié)核分支桿菌(mycobacteriumparatuberculosisMP)引起牛、羊、鹿、駱駝等以反芻動物為主多種動物共患的一種慢性、消耗性傳染病，其臨床癥狀以持續(xù)性腹瀉和慢性消瘦為特征。1895年由Johne首先發(fā)現(xiàn)本病，因此又命名為Johne’sdisease(約內(nèi)氏病)。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其劃為B類傳染病，我國也將其劃為Ⅱ類傳染病。 副結(jié)核病潛伏期長，有的終生

2、感染而不表現(xiàn)出臨床癥狀。至目前為止，尚無治療該病的有效方法，防治該病的主要方法是檢測、隔離和淘汰病畜。因此建立和研究簡便、快速、有效的檢測方法已成為人們感興趣的研究內(nèi)容之一。本論文主要圍繞羊副結(jié)核病診斷方法ELISA的建立和應(yīng)用進(jìn)行了一系列的研究，對于羊副結(jié)核病的診斷和預(yù)防方面有學(xué)術(shù)意義和應(yīng)用價值。全文共分三章，分述如下： 第一章本章綜述了副結(jié)核病概況及ELISA的基本原理。副結(jié)核病廣泛流行于世界各國，不僅給畜牧業(yè)帶來很大的經(jīng)濟

3、損失，而且對動物性產(chǎn)品的開發(fā)有不利的影響，同時對人類的健康也有潛在的威脅。從建立到現(xiàn)在的三十多年里，ELISA技術(shù)已經(jīng)日趨成熟。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。 第二章本章建立了羊副結(jié)核病ELISA診斷方法以及其初步的應(yīng)用。制備親和抗原。被檢血清以草分支桿菌吸收抗原進(jìn)行吸收。制備兔抗綿羊IgG抗體和兔抗山羊IgG抗體并以辣根過氧化物酶分別標(biāo)記，制備兔抗綿羊酶標(biāo)抗體和兔抗山羊酶標(biāo)抗體。建立用于檢測羊副結(jié)核病血清抗體的間

4、接ELISA診斷方法。并對6個不同地區(qū)的綿羊和山羊進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查。以及對綿羊和山羊進(jìn)行ELISA檢測時使用不同的酶標(biāo)抗體對酶標(biāo)值的影響。同時將新建立的ELISA診斷方法與常規(guī)的變態(tài)反應(yīng)、補反(CF)和瓊擴(AGID)進(jìn)行比較。ELISA陽性檢出率為10.8﹪、變態(tài)反應(yīng)陽性檢出率為4.9﹪、補反陽性檢出率為6.6﹪、瓊擴陽性檢出率為4.1﹪。 第三章經(jīng)研究得出結(jié)論羊副結(jié)核ELISA方法是一種敏感性好、特異性高、穩(wěn)定、快速的檢測手段