骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨修復(fù)骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的：由于創(chuàng)傷、腫瘤、感染、先天性疾病等所致的骨缺損在臨床較為常見，是骨科臨床的難題之一，每年有數(shù)百萬的骨缺損病例尋求臨床治療,其臨床治療甚為棘手。目前骨缺損的常用治療方法是骨移植，骨移植的種類包括：自體骨移植、異體骨移植、異種骨移植、人工材料及復(fù)合材料移植等。移植材料種類多樣，但這些材料各有利弊，應(yīng)用單一種材料均難以達到修復(fù)骨缺損的理想材料要求。近年來由于骨組織工程技術(shù)的發(fā)展，將細胞與特定支架材料復(fù)合，構(gòu)建有活性的組織工程化復(fù)合材料，

2、用其修復(fù)骨缺損已取得了初步成效。但如何構(gòu)建理想的骨組織工程化材料還有待進一步研究。本課題的目的是采用骨組織工程技術(shù)，以BMCSc為種子細胞，轉(zhuǎn)染攜帶hBMP-2基因的腺病毒后，以納米羥基磷灰石為支架材料，構(gòu)建組織工程化骨，并通過實驗對其骨缺損修復(fù)能力進行檢測，探討其骨缺損修復(fù)的能力，從而為骨缺損的治療提供新的依據(jù)。
　　 方法：取2個月月齡健康新西蘭大白兔60只，隨機分為A、B、C、D四組，每組動物15只，分別編號。取A、B兩組

3、動物由雙側(cè)脛骨結(jié)節(jié)外側(cè)部位穿刺抽取骨髓約2～3ml，采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)BMCSc，A組細胞傳代培養(yǎng)至第3代時，以腺病毒為載體轉(zhuǎn)染hBMP-2，轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)備用。將A組及B組細胞分別與納米羥基磷灰石支架材料復(fù)合后培養(yǎng)5～7天后備用。構(gòu)建兔橈骨骨缺損動物模型，A組：植入Adv-hBMP-2/BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨；B組：植入BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨；C組：植入Nano-HA人工骨；D組：不植入任何材料作為空白

4、對照組。術(shù)后4周、8周、12周分別行大體標(biāo)本觀察、X線檢查、組織學(xué)檢查、免疫學(xué)、掃描電鏡及生物力學(xué)測試，綜合評價Adv-hBMP-2/BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨的骨缺損修復(fù)能力。
　　 結(jié)果：Adv-hBMP-2/BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨、BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨和Nano-HA人工骨均可促進骨缺損修復(fù)，但Adv-hBMP-2/BMCSc/Nano-HA復(fù)合人工骨組新骨形成量大，骨缺損修復(fù)能力明