不同病毒載體介導(dǎo)hBMP-7基因修飾的仿生型組織工程骨修復(fù)骨缺損的對比研究.pdf

1、目的: 應(yīng)用人骨形成蛋白7(human bone morphogenetic protein-7，hBMP-7)基因分別重組2型腺相關(guān)病毒(Adeno-associated virus serotype 2，AAV2)和35型腺病毒(adenovirus’S containing fibers derived from B-group serotype 35，Ad5/F35)，在體外轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal

2、 stem cells，MSCs)后與仿生型生物玻璃/膠原蛋白/磷脂酰絲氨酸/透明質(zhì)酸(bioactive glass，collagen,hyaluronicacid and phosphatidylserine，BG-COL-HYA-PS)復(fù)合支架材料復(fù)合，植入兔橈骨缺損模型中，觀察其在體內(nèi)成骨的能力，比較哪種病毒載體更適合介導(dǎo)hBMP-7基因應(yīng)用于骨缺損的治療。 結(jié)論: 1.成功構(gòu)建了hBMP-7基因重組2型腺相關(guān)病

3、毒、35型腺病毒載體；成功在體外培養(yǎng)出表達均一、高純度的兔MSCs。 2.rAAV2-EGFP和rAd5/F35-EGFP在體外均可高效轉(zhuǎn)染兔MSCs。前者在兔MSCs中表達的熒光強度與維持的時間比后者更強和更長。 3.rAAV2-hBMP-7與rAd5/F35-hBMP-7在體外均可促進兔MSCs向成骨細胞定向分化。前者在堿性磷酸酶、鈣結(jié)節(jié)和骨鈣素等成骨細胞表型各項指標優(yōu)于后者。 4.rAAV2-hBMP-7與

4、rAd5/F35-hBMP-7轉(zhuǎn)染的兔MSCs與仿生型BG．COL-HYA-PS復(fù)合后植入SCID鼠后肢肌袋均能異位成骨，但前者成骨的時間早于后者。而rAAV2-EGFP和rAd5/F35-EGFP轉(zhuǎn)染的兔MSCs與BG-COL-HYA-PS的復(fù)合體在早期未見明確成骨。 5.骨缺損模型畔rAAV2-hBMP-7轉(zhuǎn)染的兔MSCs與仿生型復(fù)合支架BG-COL-HYA-PS組成的復(fù)合體修復(fù)的橈骨早期在抗折彎能力上強于rAd5/F35-