骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2與纖維連接蛋白和音猬因子復(fù)合納米晶膠原基骨修復(fù)大鼠骨缺損的研究.pdf

1、目的：研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogeneticprotein,BMP-2)與纖維連接蛋白(fibronectin,FN)和音猬因子(sonic hedgehog,shh)復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymalstem cells,MSCs)修飾納米晶膠原基骨(nano-Hydroxyapatite/collagen,nHAC)治療大鼠骨缺損的能力。
　　 方法：SD大鼠的MSCs分離培養(yǎng)后

2、,分為四組:對(duì)照組:單純的納米晶膠原基骨(nHAC)；實(shí)驗(yàn)組A:BMP-2與shh修飾納米晶膠原基骨((BMP-2+shh)-nHAC)；實(shí)驗(yàn)組B:BMP-2與FN修飾納米晶膠原基骨((BMP-2+FN)-nHAC)；實(shí)驗(yàn)組C:BMP-2與FN和shh修飾納米晶膠原基骨((BMP-2+FN+shh)-nHAC)。通過檢測不同時(shí)間點(diǎn)(3,6,9,12天)各組細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性、成骨細(xì)胞表型檢測和Ⅰ型膠原蛋白免疫印跡分析

3、后再分為三組植入由30只SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分三組制成股骨缺損模型,a組:缺損處植入單純nHAC；b組:植入MSCs/nHAC復(fù)合物；c組:植入復(fù)合FN/shh/BMP-2/MSCs/nHAC復(fù)合物。術(shù)后3、6、9、12周行影像學(xué)和組織學(xué)觀察；術(shù)后12周行環(huán)境掃描電鏡(Environment scanning electron microscope,ESEM)觀察。
　　 結(jié)果：各組細(xì)胞形態(tài),成骨細(xì)胞表型檢測和Ⅰ型膠原蛋白含

4、量都發(fā)生了變化:各組的細(xì)胞數(shù)和ALP活性隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長而增加,但C組變化最明顯,與相同時(shí)間點(diǎn)其他各組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。植入股骨缺損后見:①各試驗(yàn)點(diǎn)動(dòng)物均未出現(xiàn)排斥及炎癥反應(yīng),創(chuàng)口愈合良好。②術(shù)后3、6、9、12周C組與其余兩組放射學(xué)檢查評(píng)價(jià)骨生成差異有顯著性意義(P<0.01)。③組織學(xué)檢查結(jié)果顯示b.c組較a組能更快的促進(jìn)鼠股骨缺損處骨再生；c組的促進(jìn)作用更明顯。
　　 結(jié)論：MSCs/FN/shh/