生物骨載體復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白人工聽小骨的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的就在于初步探討生物骨載體復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白人工聽小骨的生物相容性及成骨效應(yīng).方法:取體重20±5g健康昆明小白鼠24只,雌雄不限,隨機(jī)抽選18只.實(shí)驗(yàn)組:用生物骨載體復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白(biological bone carrier and bone morphogenetic protein,BBC-BMP))人工聽小骨植入到小鼠左側(cè)大腿后肢肌肉內(nèi);對(duì)照組:用單純生物骨載體(biological bone ca

2、rrier,BBC)人工聽小骨植入到小鼠右側(cè)大腿后肢肌肉內(nèi),隨機(jī)分為3組,每組6只,分別在術(shù)后第4、12、16周予以處死動(dòng)物,將植入的人工聽小骨及周圍包繞組織一起取出,每組標(biāo)本隨機(jī)抽取3對(duì)置入10％福爾馬林溶液中固定,然后用50％甲酸脫鈣、梯度酒精脫水,石蠟包埋,連續(xù)切片,蘇木素-伊紅(HE)染色,最后用LEICA-DMLB型光學(xué)顯微鏡觀察,以了解人工聽小骨周圍纖維包膜形成情況以及有無成骨.每組另外31對(duì)標(biāo)本先置入4％戊二醛行前固定過夜

3、,再用10％EDTA脫鈣,然后用1％鋨酸行后固定,逐級(jí)丙酮脫水,Spurr樹脂包埋,超薄切片,雙重染色,最后用JEOL1010透射電子顯微鏡觀察,以了解生物骨載體復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白人工聽小骨內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu).剩余的6只小鼠隨機(jī)選3只同上述實(shí)驗(yàn)方法在小鼠左、右大腿肌肉內(nèi)分別植入生物骨載體復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白人工聽小骨及單純的生物骨載體人工聽小骨,另外3只做空白對(duì)照,只在小鼠左側(cè)大腿后外側(cè)做切口,不植入任何材料,分別在術(shù)后第1、3、7天處死動(dòng)物