卵巢上皮性腫瘤中MACC1的表達與HGF-C-Met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路關(guān)系的研究.pdf

1、卵巢癌是女性生殖器官腫瘤中死亡率最高的惡性腫瘤，雖然發(fā)病率僅次于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，但卻是全球婦科癌癥死亡的首要原因，嚴(yán)重威脅婦女的生命健康。早期篩查及診斷至關(guān)重要，然而卵巢解剖位置特殊，深居盆腔，患者早期癥狀不易察覺，一旦發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)患者已為晚期，且易播散轉(zhuǎn)移，術(shù)后易復(fù)發(fā)。隨著醫(yī)學(xué)分子水平的提高，診斷技術(shù)日新月異，對可疑病例行腹腔鏡及組織學(xué)檢查可部分明確診斷。然而，患者的5年生存率并不樂觀，總體預(yù)后仍不滿意。因此，探索能有效預(yù)測早期卵

2、巢癌發(fā)生、發(fā)展及早期轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素尤其重要。
　　結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)因子-1(MACC1)是通過全基因組表達技術(shù)發(fā)現(xiàn)并命名的一種基因，它不僅在結(jié)腸癌原發(fā)灶中表達，同時在轉(zhuǎn)移灶中也被表達。Stein等研究發(fā)現(xiàn)，MACC1在促進人類結(jié)腸癌細胞的增殖、侵襲方面發(fā)揮重要的作用，可使HGF誘導(dǎo)的腫瘤細胞擴散，且對結(jié)腸癌細胞轉(zhuǎn)移瘤的生長、發(fā)育有促進作用。進一步證實，MACC1超表達在誘導(dǎo)多種惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲和增殖方面與HGF/C-Met信號轉(zhuǎn)

3、導(dǎo)通路密切相關(guān)，如:結(jié)腸癌、肺癌、肝癌、胃癌、腎癌等。MACC1是HGF/C-Met信號通路中Met基因的一個關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，目前研究已證實，HGF/C-Met信號傳導(dǎo)通路在多種惡性腫瘤中發(fā)揮重要作用，尤其與卵巢癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。目前，關(guān)于MACC1在卵巢上皮性癌中的表達與HGF/C-Met的關(guān)系研究結(jié)果不一致，MACC1與卵巢癌預(yù)后的相關(guān)性仍未明確，本研究通過檢測卵巢上皮性腫瘤組織中MACC1、HGF/C-Met蛋白及mRNA

4、的表達，并測定卵巢上皮性腫瘤患者血清中MACC1的含量，分析MACC1在卵巢上皮性癌中的預(yù)測價值及與HGF/C-Met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)系，探討三者在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后中的相互作用，以期為卵巢癌的早期診斷、治療提供新的思路。
　　目的：
　　本研究通過檢測不同性質(zhì)卵巢上皮性腫瘤中MACC1、HGF/C-Met基因蛋白及mRNA的表達，初步分析MACC1異常表達在卵巢惡性上皮性腫瘤進展中的作用及意義;通過檢測患者血清中MAC

5、C1含量，評價血清MACC1在卵巢惡性上皮性腫瘤中的預(yù)測價值;進一步評估MACC1與HGF/C-Met信號通路的相關(guān)關(guān)系及臨床意義;探討MACC1參與上皮性卵巢癌侵襲和轉(zhuǎn)移的可能分子機制。
　　材料和方法：
　　1.研究對象:選取2011年6月至2013年5月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院和第一附屬醫(yī)院婦科進行手術(shù)初治的72例卵巢上皮性腫瘤患者為研究對象。經(jīng)病理證實為卵巢惡性上皮性腫瘤（惡性組）47例，其中包括漿液性囊腺癌30例、粘

6、液性囊腺癌10例、子宮內(nèi)膜樣癌7例;年齡25-68歲;臨床分期按FIGO-2000年手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn)分期，Ⅰ+Ⅱ期10例，Ⅲ+Ⅳ期37例;低分化30例;高、中分化17例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例，無轉(zhuǎn)移18例;卵巢良性上皮性腫瘤（良性組）25例;于術(shù)前/術(shù)后抽取肘靜脈血，-80℃冰箱保存?zhèn)錅y;另選年齡＞45歲，因其他原因行子宮加單/雙附件切除術(shù)患者20例作對照組。
　　2.研究方法:通過免疫組化技術(shù)檢測20例正常組、25例良性組和47

7、例惡性組患者卵巢上皮性組織中MACC1、HGF和C-Met蛋白的表達情況;通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR技術(shù)）檢測三組患者新鮮組織中MACC1和HGF/C-Met mRNA的含量;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清中MACC1含量。
　　3.統(tǒng)計學(xué)方法:應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實驗結(jié)果數(shù)據(jù)進行分析，計量資料用(X)±S表示，采用兩獨立樣本T檢驗及單因素方差分析;免疫組化結(jié)果分析應(yīng)用卡方檢驗，組間兩兩比較采用獨立兩組

8、二分類卡方檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=α/比較次數(shù)=0.0167;MACC1、HGF及C-Met表達之間的關(guān)系進行Pearson相關(guān)分檢驗水準(zhǔn)α=0.05;樣本率的比較采用X2Pearson(Chi-Square)檢驗和Fisher精確概率法;半定量資料比較用秩和檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.MACC1蛋白在正常組、良性組、惡性組的陽性表達率分別為5％(1/20)、28％(7/25)、70.21％(33/

9、47)，惡性組的陽性表達率高于其他兩組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.C-Met在卵巢上皮性癌中陽性表達率為76.59％(36/47)，良性上皮性腫瘤組織中表達率為36.0％(9/25)，HGF與C-Met在卵巢上皮性癌中共同陽性表達率63.8％(30/47)，且惡性組與正常組、良性組相比，前一組陽性表達率均高于后兩組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。而兩者在卵巢上皮性良性腫瘤組織與正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學(xué)

10、意義（P＞0.05）。
　　3.MACC1、HGF及C-Met蛋白的表達與卵巢惡性上皮性腫瘤的組織類型、患者年齡無關(guān)(P＞0.05)，而與卵巢癌的臨床分期、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)。
　　4.正常組、良性組、惡性組均可檢測到MACC1、HGF和C-Met mRNA的表達，且MACC1、HGF及C-Met在惡性組中的表達強度顯著高于良性組和正常組的相對表達量(F=295.032，P=0.00;F=177.25

11、2，P=0.00;F=264.183,P=0.00)。
　　5.MACC1、HGF和C-Met mRNA在上皮性卵巢腫瘤中表達的一致性分析經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示，在卵巢上皮腫瘤組織中HGFmRNA和C-Met mRNA的表達水平具有顯著正相關(guān)關(guān)系（r=0.849，P＜0.01）;MACC1 mRNA和HGF mRNA的表達水平具有顯著正相關(guān)關(guān)系（r=0.810，P＜0.01）;同樣，MACC1 mRNA和C-Met mRNA

12、的表達也存在著顯著的正相關(guān)關(guān)系(r=0.831，P＜0.01)。
　　6.卵巢惡性上皮性腫瘤組外周血清MACC1水平顯著高于卵巢良性腫瘤及正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);良性上皮性腫瘤組血清MACC1水平雖高于正常對照組，但二者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），且血清MACC1的水平與卵巢惡性腫瘤的年齡及組織學(xué)類型無關(guān)(P＞0.05)，與臨床分期、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)。
　　7.隨著卵

13、巢惡性上皮性腫瘤組織中MACC1表達增強，血清MACC1的濃度增高，直線回歸分析顯示二者密切相關(guān)(Pearsonr=0.870，P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　(1)MACC1、HGF、C-Met在卵巢上皮性癌中均為高表達，三者具有正相關(guān)關(guān)系，協(xié)同參與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展。
　　(2)MACC1與HGF/C-Met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路密切相關(guān)，MACC1可能通過某種途徑激活HGF/C-Met通路，調(diào)控腫瘤的侵潤和轉(zhuǎn)移，其具體的