C-kit受體在普通型骨肉瘤中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的： C-kit受體又稱CDll7蛋白，是由c-kit原癌基因編碼的具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受體。C-kit受體活化，可激活酪氨酸激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路，促進(jìn)細(xì)胞生長、增殖和分化。C-kit受體表達(dá)異常可刺激腫瘤細(xì)胞的持續(xù)增殖和抗凋亡信號(hào)的失控，有利于腫瘤的惡性增殖。C-kit蛋白在許多腫瘤中表達(dá)，它的異常激活己被證實(shí)與多種腫瘤(尤其是胃腸道間質(zhì)瘤)的發(fā)生有關(guān)，是目前的研究熱點(diǎn)，但在骨肉瘤中的研究在國內(nèi)尚未見報(bào)道。針對(duì)c-ki

2、t高表達(dá)的腫瘤，臨床上應(yīng)用酪氨酸激酶抑制劑(甲磺酸伊馬替尼)治療已取得了一定療效，這提示我們進(jìn)一步通過對(duì)c-kit受體的檢測(cè)來探討酪氨酸激酶抑制劑在骨肉瘤治療方面的應(yīng)用前景。因此，本研究旨在探討骨肉瘤中C-KIT蛋白的表達(dá)與其腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后的關(guān)系，并進(jìn)一步檢測(cè)骨肉瘤中c-kit基因外顯子11和外顯子17的突變狀態(tài),為臨床判斷預(yù)后及靶向治療骨肉瘤提供參考依據(jù)。 方法： 1)采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)c-kit蛋白在40

3、例有隨訪結(jié)果的石蠟包埋普通型骨肉瘤和10例骨纖維結(jié)構(gòu)不良組織中的表達(dá)，并進(jìn)行臨床病理分析。 2)提取石蠟標(biāo)本DNA，應(yīng)用特異性引物分別擴(kuò)增第11，17外顯子序列，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。 3)單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析c-kit基因第11、17外顯子在普通型骨肉瘤組織中的突變情況，發(fā)現(xiàn)異常泳動(dòng)條帶進(jìn)行DNA序列分析。 結(jié)果： 1)c-kit受體在普通型骨肉瘤中表達(dá)陽性率為62.5﹪(25/40)：c-kit受體高表達(dá)

4、者更易局部復(fù)發(fā)：c-kit受體高表達(dá)組的術(shù)后生存時(shí)間顯著低于c-kit受體低表達(dá)組。 2)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)證實(shí)在普通型骨肉瘤組織標(biāo)本中擴(kuò)增出完整的與預(yù)期片段一致的第11、17外顯子序列。 3)未在38例普通型骨肉瘤標(biāo)本中檢測(cè)到SSCP銀染異常條帶。經(jīng)測(cè)序分析未發(fā)現(xiàn)基因突變。 結(jié)論： C-kit受體在普通性型骨肉瘤中的表達(dá)與骨肉瘤的生物學(xué)行為有關(guān)，對(duì)評(píng)價(jià)患者的預(yù)后有一定參考價(jià)值。C-kit 外顯子的突變?cè)?/p>