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1、目的:研究Bcl-2在骨肉瘤中的表達(dá)并探討其在判斷骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用,明確其在骨肉瘤病理診斷中的意義。 方法:通過免疫組化方法檢測(cè)38例骨肉瘤組織標(biāo)本中Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果:在38例骨肉瘤組合資標(biāo)本中有20例Bcl-2表達(dá)陽(yáng)性,陽(yáng)性率(53%)。且其表達(dá)率的高低與骨肉瘤的分化程度和臨床分期密切相關(guān)。Bcl-2的表達(dá)和骨肉瘤患者接受化療的預(yù)后有密切相關(guān)。 結(jié)論:在骨肉瘤組織中Bcl-2的表達(dá)異常,提示它們可能對(duì)骨肉
2、瘤的發(fā)展起重要作用。Bcl-2可作為骨肉瘤治療的一個(gè)新靶點(diǎn)。 第二部分:紫杉醇誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞MG-63凋亡及其對(duì)bcl-2表達(dá)的影響 目的:體外實(shí)驗(yàn)探討紫杉醇對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63的生長(zhǎng)抑制及凋亡誘導(dǎo)作用。 方法:不同濃度的紫杉醇作用于骨肉瘤細(xì)胞系MG-63。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖,形態(tài)學(xué)檢測(cè)紫杉醇作用后細(xì)胞的變化,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。RT-PCR法分析紫杉出對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63中bcl-2基因表達(dá)的影響
3、。 結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)紫杉醇對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63有殺傷作用,其作用可能通過抑制bcl-2的表達(dá),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞G2/M期阻滯從而誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。 第三部分:Bcl-2反義寡核苷酸對(duì)骨肉瘤細(xì)胞的作用及其機(jī)制 目的:近期研究表明凋亡抑制基因bcl-2在多數(shù)人類腫瘤中高表達(dá),在骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。我們采用合成的bcl-2反義寡核苷酸(ASODN)作用于骨肉瘤細(xì)胞系MG-63,觀察其對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63增殖
4、和凋亡的影響。 方法:以脂質(zhì)體為載體,介導(dǎo)不同濃度Bcl-2反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染于人骨肉瘤細(xì)胞系MG-63,應(yīng)用MTT法和形態(tài)學(xué)檢測(cè)研究不同濃度Bcl-2反義寡核苷酸對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63的生長(zhǎng)抑制作用,流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染Bcl-2反義寡核苷酸后的細(xì)胞凋亡率。RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染Bcl-2反義寡核苷酸后的骨肉瘤細(xì)胞Bcl-2mRNA表達(dá)。 結(jié)論:脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染Bcl-2反義寡核苷酸可以有效抑制細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。脂質(zhì)體介
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