紫杉醇誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡及其對Bcl-2、Bax基因表達(dá)的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、上海交通大學(xué)博士后士學(xué)位論文紫杉醇誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡及其對Bcl2、Bax基因表達(dá)的影響姓名：張春林申請學(xué)位級別：博士后士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：曾炳芳20040601ABSTRACTBackgroundPac]itaxelisamicrotubule[nhibitoritsactionresultsintheformationofstablebund]esofmicrotubuleswithinthecell，increasestu

2、bulinpclymerizationinhibitstheformationofmitoticspindleandcellcycleandfinallyinducesthecellapoptosisIthasbeendentonstratedthatpacIitaxelcaninduceapoptosisinseveralcancers(suchasovarianandbreastcanceraswellas1eukemia)Howe

3、veritisnotclearhowpaclitaxelinducesapoptosisinhumanosteosarcomaandwhethertheapoptosisisrelatedtoapoptosis—regulatedgeneBcl一2andBaxObjectiveToinvestigatethemechanismthatpacIitaxelinducestheapoptosisinhumanosteosarcomaceil

4、s。andtodetecttherelationshipbetweencellapoptosisandexpressionofBcl一2andBaxsoastoprovideevideneesfortheclinicalapplicationofpaclitaxelMethodsMG63osteosarcomacellsweretreatedwithpaclitaxelofvatiousconcentrationsPI‘01iferat

5、ionwasdetermfnedbycellCOURtinacytometerchamberViabilitywasassessedbytypanbluedyeexclusionThecellmorphologicalterationswerevisualizedusingiightandtransmittingelectronmicroscopeThepercentageofapoptosisofMG63osteosarcomacel

6、lsWaSmeasuredbyTdT—mediateddUTPNickEndLabelingtechnique(TUNEL)stainingmethodandflowcytometryusingAnnexinV／PIdoublestainingmethodafter0，24，48，72and96hoursofcultureinthepresenceorabsenceofpaclitaxelTheexpressionofapoptosis

7、—regulatedgeneBcl一2andBaxweredetectedusingimmunohistochemicalstainingmethodsResultsAtime—dependentanddose—dependentcellgrowthinhibitionwasshownafterexposuretopac“taxelPacIitaxelinducedMG63cellstoundergoapoptosiswithtypic

8、alapoptosischaracteristics，includingmorphologicalchangesofchromatincondensation，chromatincrescentformation，nucleusfragmentationTheONA—cleavageandapoptosisweredetectedbyTUNELassayTheeellstreatedwithpaclitaxelshowedinitial

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