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文檔簡介
1、【背景與目的】:
F-box家族蛋白是細胞Skp-Cullin-F-box(SCF)復合體重要的成分,通過識別特異蛋白底物并經泛素-蛋白酶體途徑降解該關鍵蛋白,參與細胞周期和免疫應答等細胞生物行為的調節(jié)。FBXO39是F-box家族一員,已經被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中異常表達,提示可能參與腫瘤形成與進展,但其與骨肉瘤的關系未見相關研究報道。本研究探討FBXO39基因對體外骨肉瘤細胞增殖和凋亡的影響。
【方法】:
首
2、先采用qRT-PCR檢測FBXO39在骨肉瘤HOS、U-2OS及Saos-2三個細胞株中的表達水平,選取具有最高表達量的U-2OS細胞株進行下游實驗。然后使用含有目的基因RNA干擾序列的慢病毒進行U-2OS細胞感染,同時設置感染陰性對照病毒的目的細胞作為對照組。感染后采用熒光顯微鏡檢測感染效率, qRT-PCR和 Western Blot檢測各組細胞 FBXO39的表達量。最后,采用 Celigo細胞成像分析和MTT實驗檢測兩組細胞的增
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